Набор прамога RT-qPCR
Апісанне камплекта:
◮ Набор Direct RT-qPCR, які выкарыстоўвае зваротную транскрыптазу Foreasy і ДНК-палімеразу Foreasy HS Taq, распрацаваныя Foregene, з унікальным буферам рэакцыі робіць гэты набор моцнай устойлівасцю і сумяшчальнасцю, і ён можа непасрэдна праверыць рэакцыю з выкарыстаннем сістэмы Foregene Lysis у якасці шаблону.Гэты набор можа прымяняцца для распрацоўкі набораў для выяўлення нуклеінавых кіслот COVID-19 і іншых патагенных бактэрый.
Апісанне
Набор Direct RT-qPCR змяшчае асобна ўпакаваны буфер RT-qPCR і высокаэфектыўны ферментсумесь (Taq、M-MLV、RI), што робіць яе зручнай для стварэння камплектаў і сістэмырэгуляванне, у рамках простай праверкі.
Тэхнічныя характарыстыкі
500T, 50 000T
Складнікі камплекта
| Змест камплекта (рэакцыйная сістэма 20 мкл) | ІМ-05111-01 | ІМ-05112-01 |
| 500 т | 50 000 т | |
| Прамая сумесь ферментаў | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2 × прамы буфер RT-qPCR | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Інструкцыя | 1 | 1 |
Этапы працы
Перад падрыхтоўкай рэагентаў усе рэагенты ў наборы трэба размарозіць пры пакаёвай тэмпературы і акуратна змяшаць.
A: Рыхтаваць of шаблон і рэагент
1. Падрыхтуйце падрыхтаваны шаблон РНК (рэкамендуецца выкарыстоўваць камплект Foregene Total RNA Isolation Kit для экстракцыі і ачысткі шаблона РНК) або прадукт крэкінгу ўзору (рэкамендуецца выкарыстоўваць сістэму Foregene Lysis), спецыяльныя праймеры (10 мкМ) і іншыя адпаведныя расходныя матэрыялы, інструмент.
2. Змесціце 2× прамы буфер RT-qPCR, ddH2O без РНКазы і 20× эталонны фарбавальнік ROX (калі ён'неабходна) у скрынку з лёдам, прымусіўшы іх раставаць натуральным чынам, і асцярожна змяшаць.
B: Рыхтаваць of RT-кПЦР сістэма
стол 1 : Рыхтаваць of RT-кПЦР sсістэма
| Кампанент | Аб'ём | Канчатковая канцэнтрацыя |
| 2 × прамы буфер RT-qPCR | 10 мкл | 1× |
| Прамая сумесь ферментаў | 1мкл | |
| Праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нм |
| Зваротны праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нм |
| Зонд (4 мкМ) | 1мкл | 200 нМ |
| Шаблон (РНК або лізат) | X мкл | |
| 20×ROX эталонны фарбавальнік | - | 1* |
| РНКазы-FreeddH2O | (6,4-Х) мкл | |
| Агульны аб'ём | 20мкл |
C: Набор у RT-qPCR рэакцыя праграма
стол 2 : RT-кПЦР рэакцыіon праграма ўстаноўка (для прыклад: два-крок метад)
| Крок | тэмпература | Час | Цыклы | Змест | |
| 1 | 50 ℃ | 15 хвілін | 1* | 1 | Зваротная транскрыпцыя |
| 2 | 95 ℃ | 1 хв | 1 | Папярэдняя дэнатурацыя | |
| 3 | 95 ℃ | 10 сек | 40-45 | Дэнатурацыя | |
| 60 ℃ | 30 секунд 2* | Адпал / Пашырэнне | |||
Захоўванне і тэрмін прыдатнасці
-Камплект захоўваць пры -20± 5℃.Тэрмін дзеяння - 12 месяцаў.
-Пазбягайце паўторных цыклаў замарожвання-адтавання (<5 цыклаў).
