page_banner

Камплект Cell Direct RT qPCR—SYBR GREEN I

Апісанне камплекта:

◮Проста і эфектыўна: з дапамогай тэхналогіі Cell Direct RT узоры РНК можна атрымаць усяго за 7 хвілін.

Попыт на выбарку невялікі, можна праверыць толькі 10 клетак.

◮Высокая прапускная здольнасць: ён можа хутка выявіць РНК у клетках, культываваных у 384, 96, 24, 12, 6-лункавых пласцінах.

DNA Eraser можа хутка выдаліць вызваленыя геномы, значна паменшыць уплыў на наступныя эксперыментальныя вынікі.

Аптымізаваная сістэма RT і qPCR робіць двухэтапную зваротную транскрыпцыю RT-PCR больш эфектыўнай, а PCR - больш спецыфічнай і ўстойлівай да інгібітараў рэакцыі RT-qPCR.

foregene strength


Падрабязнасці прадукту

Тэгі прадукту

FAQ

Апісанні

У гэтым наборы выкарыстоўваецца унікальная буферная сістэма для лізіс, якая можа хутка вызваліць РНК з узораў культываваных клетак для рэакцый RT-qPCR, ухіляючы тым самым працаёмкі і працаёмкі працэс ачысткі РНК.Шаблон РНК можна атрымаць усяго за 7 хвілін.5×Direct RT Mix і 2×Прамыя рэагенты qPCR Mix-SYBR, прадстаўленыя ў камплекце, могуць хутка і эфектыўна атрымаць колькасныя вынікі ПЦР у рэжыме рэальнага часу.

5×Direct RT Mix і 2×Прамая qPCR Mix-SYBR мае моцную талерантнасць да інгібітараў, і лізат узораў можа быць выкарыстаны ў якасці шаблону для RT-qPCR непасрэдна.Гэты набор змяшчае унікальную адваротную транскриптазу Foregene высокай аффинности РНК і ДНК-палімеразу D-Taq, dNTP, MgCl2, буфер рэакцыі, аптымізатар ПЦР і стабілізатар.

Тэхнічныя характарыстыкі

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Кампаненты камплекта

Частка I

Буфер CL

Foregene Protease Plus II

Буфер ST

Частка II

Гумка ДНК

5× Direct RT Mix

2× Прамая qPCR Mix-SYBR

50× ROX эталонны фарбавальнік

ddH2O без РНКазы

Інструкцыі

Асаблівасці і перавагі

Проста і эфектыўна: з дапамогай тэхналогіі Cell Direct RT узоры РНК можна атрымаць усяго за 7 хвілін.

■ Попыт на выбарку невялікі, можна праверыць толькі 10 ячэек.

■ Высокая прапускная здольнасць: ён можа хутка выявіць РНК у клетках, культываваных у 384, 96, 24, 12, 6-лункавых пласцінах.

■ Гумка ДНК можа хутка выдаліць вызваленыя геномы, значна паменшыць уплыў на наступныя эксперыментальныя вынікі.

■ Аптымізаваная сістэма RT і qPCR робіць двухэтапную зваротную транскрыпцыю RT-PCR больш эфектыўнай, а PCR - больш спецыфічнай і ўстойлівай да інгібітараў рэакцыі RT-qPCR.

Прыкладанне з наборам

Сфера прымянення: культываваныя клеткі.

- РНК, вызваленая шляхам лізісу ўзору: дастасавальна толькі да шаблону RT-qPCR гэтага набору.

- Набор можна выкарыстоўваць у наступных мэтах: аналіз экспрэсіі генаў, праверка эфекту глушэння генаў, апасродкаванага siRNA, скрынінг лекаў і г.д.

Дыяграма

Cell Direct RT qPCR diagram

Захоўванне і тэрмін прыдатнасці

Частка I гэтага камплекта павінна захоўвацца пры тэмпературы 4℃;Частка II павінна захоўвацца пры -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II варта захоўваць пры тэмпературы 4℃,не замарожваць пры -20℃.

 Рэагент 2×Прамая qPCR Mix-SYBR павінна захоўвацца пры -20у цемры;пры частым выкарыстанні яго таксама можна захоўваць у 4℃ для кароткачасовага захоўвання (выканаць на працягу 10 дзён).


  • Папярэдні:
  • Далей:

  • Прынцыпы распрацоўкі праймераў ПЦР у рэжыме рэальнага часу

    Наперад Грунт і Зваротны Грунт

    Для ПЦР у рэжыме рэальнага часу дызайн праймераў вельмі важны.Праймеры звязаныя са спецыфічнасцю і эфектыўнасцю ПЦР-ампліфікацыі і могуць быць распрацаваны з улікам наступных прынцыпаў:

    Даўжыня грунтоўкі: 18-30bp.

    Змест ГХ: 40-60%.

    Значэнне Tm: праграмнае забеспячэнне для распрацоўкі грунтоўкі, такое як Primer 5, можа даць значэнне Tm грунтоўкі.Значэнні Tm першапачатковага і наступнага праймераў павінны быць як мага бліжэй.Можна таксама выкарыстоўваць формулу разліку Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Пры правядзенні ПЦР у якасці тэмпературы адпалу звычайна выбіраецца тэмпература ніжэйшая за значэнне Tm праймера, роўная 5 °C (адпаведнае павышэнне тэмпературы адпалу можа павялічыць спецыфічнасць рэакцыі ПЦР).

    Праймеры і ПЦР прадукты:

    Даўжыня прадукту ПЦР-ампліфікацыі праймера пераважна 100-150 п.н.

    Варта па магчымасці пазбягаць дызайну грунтоўкі ў другаснай структурнай вобласці шаблону.

    Пазбягайце адукацыі 2 або больш камплементарных падставаў паміж 3′ канцамі вышэй па плыні і ніжэй па плыні праймераў.

    Праймер 3′ канцавы базы не можа прысутнічаць з 3 дадатковымі паслядоўнымі G або C.

    Самі праймеры не могуць мець камплементарных структур, у адваротным выпадку ўтворыцца структура шпількі, якая ўплывае на ПЦР-ампліфікацыю.

    ATCG павінна быць размеркавана як мага раўнамерна ў паслядоўнасці праймераў, а 3'-тэрмінавага падставы варта пазбягаць, паколькі Т.

    Дадатак 1: камплект кампанентаў Cell Direct RT-qPCR Kit

    1.Раствор для лізісу клетак


    Раствор для лізісу клетак

    Кампаненты камплекта

    (24-лункавая сістэма лізіс / лунка)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 т

    500 т

    Часткая

    Буфер CL

    20 мл

    100 мл

    Foregene Protease Plus II

    400 мкл

    1 мл × 2

    Буфер ST

    1 мл × 2

    10 мл

    ЧасткаII

    Гумка ДНК

    400 мкл

    1 мл × 2

    2.RT Mix


    RT Mix

    Кампаненты камплекта

    (20 мкл рэакцыйнай сістэмы)

    DRT-01011-B1

    200 т

    5× Direct RT Mix

    800 мкл

    ddH без РНКазы2O

    1,7 мл × 2

     

    3.qPCR Mix


    qPCR сумесь

    Кампаненты камплекта

    (20 мкл рэакцыйнай сістэмы)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 т

    1000 т

    2× Прамая qPCR Mix-SYBR

    1 мл × 2

    1,7 мл × 6

    50× ROX эталонны фарбавальнік

    40 мкл

    200 мкл

    ddH без РНКазы2O

    1,7 мл

    10 мл

    Напішыце сваё паведамленне тут і адпраўце яго нам

    ЗвязаныПрадукты