• facebook
  • Linkedin
  • youtube
банэр_старонкі

Набор Cell Direct RT qPCR—SYBR GREEN I Наборы для прамога лізісу клетак, гатовыя да аднаэтапнай qRT-PCR

Апісанне камплекта:

Кат.№DRT-01011/01012

Для клетачнай прамой RT-qPCR з выкарыстаннем 10-1 000 000 клетак,

і правядзенне RT-qPCR непасрэдна з клетак без папярэдняй ачысткі РНК.

Клеткі лізіруюцца непасрэдна для вызвалення РНК для RT-qPCR;сістэма высокай талерантнасці робіць непатрэбным ачыстку РНК і непасрэднае выкарыстанне клеткавых лізатаў у якасці матрыц РНК для рэакцый RT.Хутка і зручна;высокая адчувальнасць, моцная спецыфічнасць і добрая стабільнасць.

◮Просты і эфектыўны: з дапамогай тэхналогіі Cell Direct RT ўзоры РНК можна атрымаць усяго за 7 хвілін.

Попыт на выбарку невялікі, можна праверыць усяго 10 клетак.

◮Высокая прапускная здольнасць: ён можа хутка выяўляць РНК у клетках, культывуемых у 384, 96, 24, 12, 6-лункавых пласцінах.

DNA Eraser можа хутка выдаліць вызваленыя геномы, значна паменшыць уплыў на наступныя эксперыментальныя вынікі.

Аптымізаваная сістэма RT і qPCR робіць двухэтапную зваротную транскрыпцыю RT-PCR больш эфектыўнай, а ПЦР больш спецыфічнай і больш устойлівай да інгібітараў рэакцыі RT-PCR.


Дэталь прадукту

Тэгі прадукту

FAQ

Спампаваць рэсурсы

Апісанні

У гэтым наборы выкарыстоўваецца унікальная буферная сістэма лізісу, якая можа хутка вызваляць РНК з культывуемых узораў клетак для рэакцый RT-qPCR, тым самым ухіляючы працаёмкі і працаёмкі працэс ачысткі РНК.Шаблон РНК можна атрымаць усяго за 7 хвілін.5×Direct RT Mix і 2×Рэагенты Direct qPCR Mix-SYBR, якія ўваходзяць у камплект, дазваляюць хутка і эфектыўна атрымаць колькасныя вынікі ПЦР у рэальным часе.

5×Direct RT Mix і 2×Direct qPCR Mix-SYBR мае моцную талерантнасць да інгібітараў, і лізат узораў можна выкарыстоўваць у якасці шаблону непасрэдна для RT-qPCR.Гэты набор змяшчае унікальную высокаафінную зваротную транскрыптазу Foregene з РНК і ДНК-палімеразу Hot D-Taq, dNTP, MgCl2, рэакцыйны буфер, ПЦР-аптымізатар і стабілізатар.

Тэхнічныя характарыстыкі

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Складнікі камплекта

Частка I

Буфер CL

Foregene Protease Plus II

Буфер ST

Частка II

Сціральнік ДНК

5× Direct RT Mix

2× Direct qPCR Mix-SYBR

50× эталонны фарбавальнік ROX

ddH2O без РНКазы

Інструкцыя

Асаблівасці і перавагі

Проста і эфектыўна: з дапамогай тэхналогіі Cell Direct RT ўзоры РНК можна атрымаць усяго за 7 хвілін.

■ Попыт на выбарку невялікі, можна праверыць усяго 10 клетак.

■ Высокая прапускная здольнасць: ён можа хутка выяўляць РНК у клетках, культывуемых у 384, 96, 24, 12, 6-лункавых пласцінах.

■ DNA Eraser можа хутка выдаліць вызваленыя геномы, значна паменшыць уплыў на наступныя эксперыментальныя вынікі.

■ Аптымізаваная сістэма RT і qPCR робіць двухэтапную зваротную транскрыпцыю RT-PCR больш эфектыўнай, а ПЦР больш спецыфічнай і больш устойлівай да інгібітараў рэакцыі RT-PCR.

Прыкладанне камплекта

Сфера прымянення: культываванне клетак.

- РНК, вызваленая ў выніку лізісу ўзору: прымяняецца толькі да шаблону RT-qPCR гэтага набору.

- Набор можа быць выкарыстаны для наступных мэт: аналіз экспрэсіі генаў, праверка апасродкаванага siRNA эфекту сайленсінгу генаў, скрынінг лекаў і г.д.

Дыяграма

Дыяграма Cell Direct RT qPCR

Захоўванне і тэрмін прыдатнасці

Частка I гэтага набору павінна захоўвацца пры тэмпературы 4 ℃;Частка II павінна захоўвацца пры -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II варта захоўваць пры 4℃, не замярзаць пры -20 ℃.

 Рэагент 2×Direct qPCR Mix-SYBR трэба захоўваць пры -20у цемры;пры частым выкарыстанні яго таксама можна захоўваць у 4℃ для кароткачасовага захоўвання (выкарыстаць на працягу 10 дзён).


  • Папярэдняя:
  • далей:

  • Прынцыпы распрацоўкі праймераў ПЦР у рэальным часе

    Пярэдні буквар і адваротны буквар

    Для ПЦР у рэжыме рэальнага часу дызайн праймера вельмі важны.Праймеры звязаны са спецыфічнасцю і эфектыўнасцю ПЦР-ампліфікацыі і могуць быць распрацаваны з улікам наступных прынцыпаў:

    Даўжыня буквара: 18-30 п.н.

    Змест ГХ: 40-60%.

    Значэнне Tm: праграмнае забеспячэнне для распрацоўкі Primer 5, можа даць значэнне Tm праймера.Значэнні Tm праймераў вышэй і ніжэй па плыні павінны быць як мага больш блізкімі.Таксама можна выкарыстоўваць формулу разліку Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Пры правядзенні ПЦР у якасці тэмпературы адпалу звычайна выбіраецца тэмпература ніжэйшая за значэнне Tm праймера на 5 °C (адпаведнае павелічэнне тэмпературы адпалу можа павялічыць спецыфічнасць рэакцыі ПЦР).

    Праймеры і прадукты ПЦР:

    Даўжыня прадукту ПЦР-ампліфікацыі праймера пераважна складае 100-150 пн.

    Наколькі гэта магчыма, варта пазбягаць дызайнерскіх грунтовак у другаснай структурнай вобласці шаблону.

    Пазбягайце ўтварэння 2 ці больш камплементарных асноў паміж 3'-канцамі праймераў уверх і ўніз па плыні.

    Канцавая база праймера 3′ не можа прысутнічаць з 3 дадатковымі паслядоўнымі G або C.

    Самі праймеры не могуць мець дадатковыя структуры, інакш утворыцца шпількавая структура, якая ўплывае на ПЦР-ампліфікацыю.

    ATCG павінен быць размеркаваны як мага больш раўнамерна ў паслядоўнасці праймера, і варта пазбягаць 3'-тэрмінальнага падставы, паколькі T.

    Дадатак 1: дадатковы пакет кампанентаў Cell Direct RT-qPCR Kit

    1.Раствор для лізісу клетак


    Раствор для лізісу клетак

    Складнікі камплекта

    (24-лункавая сістэма лізіс / лунка)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 т

    500 т

    часткая

    Буфер CL

    20 мл

    100 мл

    Foregene Protease Plus II

    400 мкл

    1 мл × 2

    Буфер ST

    1 мл × 2

    10 мл

    часткаII

    Сціральнік ДНК

    400 мкл

    1 мл × 2

    2.RT Mix


    RT Mix

    Складнікі камплекта

    (рэакцыйная сістэма 20 мкл)

    DRT-01011-B1

    200 т

    5× Direct RT Mix

    800 мкл

    ddH без РНКазы2O

    1,7 мл × 2

     

    3.сумесь qPCR


    qPCR Mix

    Складнікі камплекта

    (рэакцыйная сістэма 20 мкл)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 т

    1000 т

    2× Direct qPCR Mix-SYBR

    1 мл × 2

    1,7 мл × 6

    50× эталонны фарбавальнік ROX

    40 мкл

    200 мкл

    ddH без РНКазы2O

    1,7 мл

    10 мл

    Інструкцыі па эксплуатацыі:

    QuickEasyTM Cell Direct RT-qPCR Kit-SYBR Green I

    Напішыце тут сваё паведамленне і адпраўце яго нам

    Роднасныяпрадукты