Lnc-RT Heroᵀᴹ I (з gDNase) (суперпрэмікс для сінтэзу першай ніткі кДНК з lncRNA)
Тэхнічныя характарыстыкі
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (з gDNase) - гэта сістэма зваротнай транскрыпцыі, спецыяльна распрацаваная для lncRNA для хуткага выдалення забруджвання геномнай ДНК.5×gDNase Mix можа хутка выдаліць астатні геном у РНК пры 42°C на працягу 2 хвілін, эфектыўна пазбягаючы ўплыву геному на вынікі кПЦР.
5×L-RT HeroTM Mix змяшчае зваротную транскрыптазу Foregene LncRNA, спецыяльна распрацаваную Foregene, якая з'яўляецца новым тыпам зваротнай транскрыптазы спецыяльна для lncRNA і іншых шаблонаў комплексу доўгіх РНК, з больш моцным сродством да РНК і больш высокай эфектыўнасцю запісу зваротнага ходу.Аптымізаваная сістэма павялічвае хуткасць зваротнай транскрыпцыі і можа лёгка транскрыбаваць шаблоны РНК з высокім утрыманнем GC і складанай другаснай структурай.Сінтэз першага ланцуга кДНК можа быць завершаны пры 42°C за 15 хвілін.
Складнікі камплекта
| 5× gDNase Mix |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ddH2O без РНКазы |
| Інструкцыя |
Асаблівасці і перавагі
■Эфектыўная магчымасць выдалення гДНК, якая можа выдаліць гДНК у шаблоне на працягу 2 хвілін.
■ Ён можа эфектыўна адмяняць транскрыпцыю lncRNA.Калі прадукт зваротнай транскрыпцыі падвяргаецца КПЦР, значэнне Ct ніжэй, чым у звычайнай сістэмы зваротнай транскрыпцыі.
■ Эфектыўная сістэма зваротнай транскрыпцыі, для завяршэння сінтэзу першага ланцуга кДНК патрабуецца ўсяго 15 хвілін.
■ Складаныя шаблоны: шаблоны з высокім утрыманнем GC і складанай другаснай структурай таксама могуць быць адменены з высокай эфектыўнасцю.
■ Высокаадчувальная сістэма зваротнай транскрыпцыі, шаблоны ўзроўню pg таксама могуць атрымаць высакаякасную кДНК.
■ Сістэма зваротнай транскрыпцыі валодае высокай тэрмічнай стабільнасцю, аптымальная тэмпература рэакцыі - 42℃, і ён па-ранейшаму мае добрую прадукцыйнасць зваротнай транскрыпцыі пры 50℃.
Прыкладанне камплекта
Адносны колькасны аналіз lncRNA.
Абсалютны колькасны аналіз lncRNA.
Ён можа хутка і дакладна аналізаваць сляды РНК, такія як РНК віруса.
Зваротная транскрыпцыя РНК-матрыц з высокім утрыманнем GC або складанай другаснай структурай.
Працоўны працэс
Захоўванне і тэрмін прыдатнасці
Захоўваць камплект варта пры тэмпературы -20°С. Захоўваюць сродак у халадзільнай камеры з пастаяннай тэмпературай пры -20°C адразу пасля атрымання.Пры адпаведных умовах захоўвання прадукт не пагоршыць характарыстыкі на працягу 1-гадовага перыяду дзеяння.
Кіраўніцтва па аналізе праблем
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-спецыфічнае ўзмацненне
1. Неабгрунтаваны дызайн грунтоўкі
Рэкамендацыя: распрацуйце грунтоўкі ў адпаведнасці з прынцыпамі дызайну грунтовак.
2. Рэшткі геному.
Прапанова: пераканайцеся, што тэмпература рэакцыі выдалення гДНК на першым этапе складае 42°C, і час рэакцыі таксама можна павялічыць да 5 хвілін.
Няма сігналу ўзмацнення з дапамогай RT-qPCR
1. РНК дэградуе.
Рэкамендацыя: Матэрыял для экстракцыі РНК павінен быць максімальна свежым, а РНК павінна быць высокай якасці і высокай чысціні.
2. РНК змяшчае інгібітары.
Рэкамендацыя: інгібітары зваротнай транскрыпцыі звычайна ўключаюць SDS, солі гуанідзіну, EDTA і г.д. Рэкамендуецца прамыць асадак РНК 70% этанолам, каб выдаліць інгібітары.
3. Праблемы дызайну буквара.
Рэкамендацыя: у адпаведнасці з прынцыпам канструкцыі грунтоўкі, перапрацуйце грунтоўкі для праверкі.
Мэтавая паласа з'яўляецца ў пустым пункце кіравання
1. Забруджванне аперацыйных інструментаў або рэагентаў.
Рэкамендацыя: усе рэагенты або абсталяванне для эксперыменту павінны быць апрацаваны ў аўтаклаве.Будзьце асцярожныя і далікатныя пры звароце, каб прадухіліць усмоктванне ўзораў ДНК у піпетку або выліванне з цэнтрыфужнай прабіркі.
2. Заражэнне адбылося падчас падрыхтоўкі рэакцыйнай сістэмы ПЦР.
Рэкамендацыя: Прымайце неабходныя меры засцярогі пры працы, напрыклад: апранайце латексные пальчаткі, выкарыстоўвайце фільтруючыя наканечнікі.Выкарыстоўвайце сумесь ПЦР у рэжыме рэальнага часу ў абароненай ад забруджвання сістэмы.
3. Праймеры дэградавалі.
Прапанова: выкарыстоўвайце электрафарэз SDS-PAGE, каб вызначыць, ці пагаршаюцца праймеры, і заменіце іх новымі праймерамі для эксперыментаў па выяўленні флуарэсцэнцыі.
Кіраўніцтва па эксплуатацыі:
