• facebook
  • Linkedin
  • youtube
банэр_старонкі

ПЦР у рэжыме рэальнага часу Easyᵀᴹ-Taqman

Апісанне камплекта:

Просты—2× ПЦР сумесь для памяншэння памылак эксперыменту і часу працы

Спецыфічны - аптымізаваны буфер і фермент Taq з гарачым стартам могуць прадухіліць неспецыфічную ампліфікацыю і адукацыю дымера праймера

Высокая адчувальнасць - можа выяўляць нізкія копіі шаблону

Добрая ўніверсальнасць — сумяшчальнасць з большасцю прыбораў для колькаснай ПЦР у рэальным часе

чужая сіла


Дэталь прадукту

Тэгі прадукту

FAQ

Апісанні камплектаў

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman прадастаўляецца Real Time PCR EasyTM-Taqman kit - гэта новая сістэма папярэдняй сумесі, якая выкарыстоўвае спецыяльныя флуоресцентные зонды для рэакцый ампліфікацыі ПЦР у рэжыме рэальнага часу, якія могуць значна палепшыць спецыфічнасць прадукту і адчувальнасць рэакцыі.ROX пастаўляецца ў якасці фарбавальніка для ўнутранага кантролю.

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman змяшчае унікальную ДНК-палімеразу Taq з гарачым пачаткам Foregene.У параўнанні са звычайнымі ферментамі Taq, ён мае такія перавагі, як высокая эфектыўнасць узмацнення, моцная ўдзельная здольнасць да ўзмацнення і нізкая хуткасць неадпаведнасці.Гэта можа паменшыць неспецыфічную ампліфікацыю і павысіць дакладнасць ПЦР.

Тэхнічныя характарыстыкі

Лёгкая ПЦР у рэальным часеTM-Такман

Склад набору (сістэма 20 мкл)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500 т

1000 т

2000T

Сапраўдная ПЦРлёгкаTMЗмяшаць-Такман

1 мл ×2

1.7 мл ×3

1.7 мл ×6

1.7 мл ×12

20×Эталонны фарбавальнік ROX

200 мкл

0,5ml

1 мл

1 мл × 2

ddH без ДНКаз2O

1,7 мл

1.7 мл ×2

10 мл

20 мл

Iінструкцыя

1

1

1

1

Асаблівасці і перавагі

■ Просты—сумесь ПЦР у 2 разы для скарачэння памылак эксперыменту і часу працы

■ Спецыфічны—аптымізаваны буфер і фермент Taq з гарачым стартам могуць прадухіліць неспецыфічную ампліфікацыю і адукацыю дымера праймера

■ Высокая адчувальнасць - можа выяўляць нізкія копіі шаблону

■ Добрая ўніверсальнасць — сумяшчальнасць з большасцю прыбораў для колькаснай ПЦР у рэальным часе

Прыкладанне камплекта

qPCR аналіз

Працоўны працэс

RT PCR-Такман
Графіка RT PCR-Taqman

Графічны

Захоўванне і тэрмін прыдатнасці

Гэты набор трэба захоўваць удалечыні ад святла і пры тэмпературы -20 ℃.Пры частым выкарыстанні яго таксама можна захоўваць пры тэмпературы 4 ℃ на працягу кароткага перыяду часу (10 дзён).


  • Папярэдняя:
  • далей:

  • Няма сігналаў узмацнення

    1. ДНК-палімераза Taq у наборы губляе сваю актыўнасць з-за няправільнага захоўвання або заканчэння тэрміну прыдатнасці набору.
    Рэкамендацыя: Пацвердзіце ўмовы захоўвання набору;паўторна дадайце адпаведную колькасць ДНК-палімеразы Taq у сістэму ПЦР або купіце новы набор ПЦР у рэальным часе для адпаведных эксперыментаў.

    2. У шаблоне ДНК шмат інгібітараў Taq ДНК-палімеразы.
    Прапанова: ачысціце шаблон або паменшыце колькасць выкарыстоўванага шаблону.

    3. Канцэнтрацыя Mg2+ не падыходзіць.
    Рэкамендацыя: канцэнтрацыя Mg2+ у сумесі 2× Real PCR, якую мы прапануем, складае 3,5 мМ.Аднак для некаторых спецыяльных праймераў і шаблонаў канцэнтрацыя Mg2+ можа быць вышэй.Такім чынам, вы можаце непасрэдна дадаць MgCl2 для аптымізацыі канцэнтрацыі Mg2+.Для аптымізацыі рэкамендуецца кожны раз павялічваць Mg2+ на 0,5 ммоль.

    4. Умовы ПЦР-ампліфікацыі не падыходзяць, а паслядоўнасць праймера або канцэнтрацыя неналежныя.
    Прапанова: пацвердзіце правільнасць паслядоўнасці праймера і праймер не пагаршаецца;калі ўзмацненне сігналу дрэннае, паспрабуйце знізіць тэмпературу адпалу і адпаведным чынам адрэгуляваць канцэнтрацыю грунтоўкі.

    5. Колькасць шаблону занадта малая або занадта вялікая.
    Рэкамендацыя: выканайце градыентнае развядзенне лінеарызацыі шаблону і абярыце канцэнтрацыю шаблону з найлепшым эфектам ПЦР для эксперыменту ПЦР у рэальным часе.

    NTC мае занадта высокае значэнне флуарэсцэнцыі

    1. Забруджванне рэагентам падчас працы.
    Рэкамендацыя: замяніце на новыя рэагенты для эксперыментаў ПЦР у рэальным часе.

    2. Заражэнне адбылося падчас падрыхтоўкі рэакцыйнай сістэмы ПЦР.
    Рэкамендацыя: падчас працы прымайце неабходныя меры абароны, такія як: апранайце латексныя пальчаткі, карыстайцеся наканечнікам піпеткі з фільтрам і г.д.

    3. Праймеры пагаршаюцца, і дэградацыя праймераў прывядзе да неспецыфічнага ўзмацнення.
    Прапанова: выкарыстоўвайце электрафарэз SDS-PAGE, каб вызначыць, ці пагаршаюцца праймеры, і заменіце іх новымі праймерамі для эксперыментаў ПЦР у рэальным часе.

    Праймерны дымер або неспецыфічная ампліфікацыя

    1. Канцэнтрацыя Mg2+ не падыходзіць.
    Рэкамендацыя: канцэнтрацыя Mg2+ у сумесі 2× Real PCR EasyTM Mix, якую мы прапануем, складае 3,5 мм.Аднак для некаторых спецыяльных праймераў і шаблонаў канцэнтрацыя Mg2+ можа быць вышэй.Такім чынам, вы можаце непасрэдна дадаць MgCl2 для аптымізацыі канцэнтрацыі Mg2+.Для аптымізацыі рэкамендуецца кожны раз павялічваць Mg2+ на 0,5 ммоль.

    2. Тэмпература ПЦР-адпалу занадта нізкая.
    Прапанова: кожны раз павялічвайце тэмпературу ПЦР-адпалу на 1 ℃ або 2 ℃.

    3. Прадукт ПЦР занадта доўгі.
    Рэкамендацыя: даўжыня прадукту ПЦР у рэальным часе павінна складаць 100-150 біт, не больш за 500 біт.

    4. Праймеры пагаршаюцца, і дэградацыя праймераў прывядзе да з'яўлення спецыфічнага ўзмацнення.
    Прапанова: выкарыстоўвайце электрафарэз SDS-PAGE, каб вызначыць, ці пагаршаюцца праймеры, і заменіце іх новымі праймерамі для эксперыментаў ПЦР у рэальным часе.

    5. Сістэма ПЦР няправільная, або сістэма занадта малая.
    Прапанова: занадта малая рэакцыйная сістэма ПЦР прывядзе да зніжэння дакладнасці выяўлення.Лепш за ўсё выкарыстоўваць рэакцыйную сістэму, рэкамендаваную прыборам для колькаснай ПЦР, каб паўторна правесці эксперымент ПЦР у рэальным часе.

    Дрэнная паўтаральнасць колькасных значэнняў

    1. Прыбор няспраўны.
    Прапанова: могуць быць памылкі паміж кожным адтулінай ПЦР прыбора, што прыводзіць да дрэннай узнаўляльнасці падчас рэгулявання тэмпературы або выяўлення.Калі ласка, праверце ў адпаведнасці з інструкцыямі адпаведнага прыбора.

    2. Чысціня ўзору не вельмі добрая.
    Рэкамендацыя: нячыстыя ўзоры прывядуць да дрэннай узнаўляльнасці эксперыменту, што ўключае ў сябе чысціню шаблону і праймераў.Лепш за ўсё паўторна ачысціць шаблон, а праймеры лепш за ўсё ачысціць SDS-PAGE.

    3. Час падрыхтоўкі і захоўвання сістэмы ПЦР занадта вялікі.
    Прапанова: выкарыстоўвайце ПЦР-сістэму ў рэальным часе для ПЦР-эксперыменту адразу пасля падрыхтоўкі і не пакідайце яе надоўга.

    4. Умовы ПЦР-ампліфікацыі не падыходзяць, а паслядоўнасць праймера або канцэнтрацыя неналежныя.
    Прапанова: пацвердзіце правільнасць паслядоўнасці праймера і праймер не пагаршаецца;калі ўзмацненне сігналу дрэннае, паспрабуйце знізіць тэмпературу адпалу і адпаведным чынам адрэгуляваць канцэнтрацыю грунтоўкі.

    5. Сістэма ПЦР няправільная, або сістэма занадта малая.
    Прапанова: занадта малая рэакцыйная сістэма ПЦР прывядзе да зніжэння дакладнасці выяўлення.Лепш за ўсё выкарыстоўваць рэакцыйную сістэму, рэкамендаваную прыборам для колькаснай ПЦР, каб паўторна правесці эксперымент ПЦР у рэальным часе.

    Напішыце тут сваё паведамленне і адпраўце яго нам