Стэрылізацыя наканечнікаў піпетак і EP-прабірак і г.д.

1. Прыгатуйце 0,1% (адна тысячная) DEPC (высокатаксічнае рэчыва) з дэіянізаванай вадой, асцярожна выкарыстоўвайце яго ў выцяжной шафе і захоўвайце пры тэмпературы 4°C удалечыні ад святла;

Вада DEPC - гэта чыстая вада, апрацаваная DEPC і стэрылізаваная высокай тэмпературай і высокім ціскам.Праверана на адсутнасць РНКазы, ДНКазы і пратэіназы.

2. Змесціце наканечнік піпеткі і трубку EP у 0,1% DEPC і пераканайцеся, што наканечнік піпеткі і трубка EP запоўнены 0,1% DEP.

3. Абараніце ад святла, дайце пастаяць на ноч (12-24 гадзіны)

4. Скрынку з наканечнікам і трубкай EP не трэба замочваць у DEPC.Пасля грубага выдалення вады DEPC з наканечніка або трубкі EP спакуйце яго і загарніце.

5. 121 градус Цэльсія, 30 хвілін

6. 180 градусаў Цэльсія, сушыць на працягу некалькіх гадзін (не менш за 3 гадзін)

Заўвага: а.Апранайце латексные пальчаткі і маскі пры працы з DEPC!b, або без стэрылізацыі DEPC, 130 ℃, 90 хвілін у аўтаклаве (у многіх лабараторыях высокатэмпературная стэрылізацыя праводзіцца двойчы)

Меркаванні па экстракцыі РНК

Дзве асноўныя з'явы недастатковасці ізаляцыі тканкавай РНК

Дэградацыя РНК і рэшткі прымешак у тканінах,што тычыцца дэградацыі, давайце спачатку паглядзім, чаму РНК, вынятая з культывуемых клетак, не лёгка раскладаецца.Усе існуючыя рэагенты для экстракцыі РНК утрымліваюць кампаненты, якія хутка інгібіруюць РНКазу.Дадайце лізат да культывуемых клетак і проста змяшайце, усе клеткі можна старанна змяшаць з лізатам, і клеткі будуць цалкам лізаваныя.Пасля лізісу клетак актыўныя інгрэдыенты лізата неадкладна інгібіруюць ўнутрыклеткавую РНКазу, таму РНК застаецца непашкоджанай.Гэта значыць, паколькі культывуемыя клеткі лёгка і цалкам кантактуюць з лізатам, іх РНК не лёгка дэградуе;з іншага боку, РНК у тканіны лёгка дэградуе, таму што клеткам у тканіны няпроста хутка звязацца з лізатам.за кошт дастатковага кантакту.Такім чынам,калі выказаць здагадку, што ёсць спосаб ператварыць тканіну ў адну клетку, адначасова інгібіруючы актыўнасць РНК, праблема дэградацыі можа быць цалкам вырашана.

Найбольш эфектыўным метадам з'яўляецца памол вадкім азотам.Аднак метад памолу вадкім азотам вельмі клапотны, асабліва калі колькасць узораў вялікая.Гэта прывяло да наступнай лепшай рэчы: гамагенізатар.TheгомогенизаторМетад не разглядае пытанне аб тым, як актыўнасць РНКазы інгібіруецца да таго, як клеткі ўступяць у кантакт з лізатам, а хутчэй моліцца, каб хуткасць разбурэння тканін была большай, чым хуткасць, з якой унутрыклеткавая РНКаза разбурае РН.

Эфект электрычнага гомогенизатора лепш,і эфект шклянога гамагенізатар дрэнны, але ў цэлым, метад гамагенізатар не можа прадухіліць з'ява дэградацыі.Такім чынам, калі экстракцыя пагаршаецца, варта выкарыстоўваць арыгінальны электрычны гамагенізатар для драбнення вадкім азотам;арыгінальны шкляны гамагенізатар варта замяніць на электрычны гамагенізатар або непасрэдна здрабніць з вадкім азотам.Задача практычна на 100% выканальная.атрымаць рашэнне.

Праблема рэшткаў прымешак, якая ўплывае на наступныя эксперыменты, мае больш разнастайныя прычыны, чым дэградацыя, і рашэнні, адпаведна, розныя.У заключэнне,калі ёсць дэградацыя або рэшткавыя прымешкі ў тканіны, метад экстракцыі/рэагент для канкрэтнага эксперыментальнага матэрыялу павінен быць аптымізаваны.Вам неабавязкова выкарыстоўваць свае каштоўныя ўзоры для аптымізацыі: вы можаце купіць дробных жывёл, такіх як рыба/курыца на рынку, узяць адпаведную частку матэрыялу для экстракцыі РНК, а іншую частку для экстракцыі бялку - здрабніць з экстрактам рота, страўніка і кішачніка.

Мэтавая РНК экстрагаванай РНК выкарыстоўваецца для розных наступных эксперыментаў, і яе патрабаванні да якасці розныя

канструкцыя бібліятэкі кДНК патрабуе цэласнасці РНК без рэшткаў інгібітараў ферментных рэакцый;Northern патрабуе больш высокай цэласнасці РНК і меншых патрабаванняў да рэшткаў інгібітараў ферментных рэакцый;RT-PCR не патрабуе занадта высокай цэласнасці РНК,але інгібіруе ферментныя рэакцыі.Патрабаванні да рэшткаў строгія.Уваход вызначае выхад;кожны раз, калі мэта складаецца ў тым, каб атрымаць РНК самай высокай чысціні, гэта будзе каштаваць людзям і грошай.

Збор/захоўванне пробаў

Фактары, якія ўплываюць на дэградацыю Пасля таго, як узор пакіне жывое цела/або першапачатковае асяроддзе росту, эндагенныя ферменты ў пробе пачнуць дэградаваць РНК,а хуткасць дэградацыі звязана з утрыманнем эндагенных ферментаў і тэмпературай.Традыцыйна існуе толькі два спосабу цалкам інгібіраваць актыўнасць эндагеннага фермента: неадкладна дадаць лізат і старанна і хутка гамагенізаваць;нарэзаць невялікімі кавалачкамі і адразу замарозіць у вадкім азоце.Абодва падыходу патрабуюць хуткай працы.Апошні падыходзіць для ўсіх узораў, у той час як першы падыходзіць толькі для тканін з нізкім утрыманнем клетак і эндагенных ферментаў і лягчэй гамагенізаваць.У прыватнасці, раслінныя тканіны, печань, вілачкавай залозы, падстраўнікавую залозу, селязёнку, мозг, тлушч, мышачную тканіну і г.д. лепш замарозіць вадкім азотам, перш чым працягваць.

Фрагментацыя і гамагенізацыя проб

Фактары, якія ўплываюць на дэградацыю і ўраджайнасць Фрагментацыя ўзорудля дбайнай гамагенізацыі, які прызначаны для поўнага і поўнага вызвалення РНК.Клеткі можна непасрэдна гамагенізаваць, не разбіваючы.Тканіны могуць быць гамагенізаваны толькі пасля разлому.Дрожджы і бактэрыі павінны быць разбіты адпаведнымі ферментамі, перш чым яны могуць быць гамагенізаваны.Тканіны з больш нізкім утрыманнем эндагенных ферментаў і больш лёгкай гамагенізацыяй могуць быць здробнены і гамагенізаваны ў адзін раз у лізаце з дапамогай гомогенизатора;раслінныя тканіны, печань, вілачкавай залозы, падстраўнікавая жалеза, селязёнка, мозг, тлушч, цягліцавая тканіна і іншыя ўзоры. У іх альбо высокае ўтрыманне эндагенных ферментаў, альбо іх цяжка гамагенізаваць,таму разбурэнне тканіны і гамагенізацыя павінны праводзіцца асобна.Найбольш надзейным і прадуктыўным метадам драбнення з'яўляецца памол вадкім азотам, а найбольш надзейным спосабам гамагенізацыі - выкарыстанне электрычнага гомогенизатора.Асаблівая заўвага аб драбненні з вадкім азотам: узор нельга размарожваць на працягу ўсяго працэсу драбнення, так як эндагенныя ферменты, хутчэй за ўсё, будуць працаваць у замарожаным стане.

Выбар лизата

Якія ўплываюць на зручнасць працы і фактары рэшткавых эндагенных прымешак Звычайна выкарыстоўваюцца растворы для лізісу могуць амаль інгібіраваць актыўнасць РНКазы.Такім чынам, ключавым момантам выбару раствора для лізісу з'яўляецца разгляд у спалучэнні з метадам ачысткі.Ёсць адно выключэнне:узорах з высокім утрыманнем эндагенных ферментаў рэкамендуецца выкарыстоўваць лізат, які змяшчае фенол, каб павялічыць здольнасць інактываваць эндагенныя ферменты.

Выбар метаду ачысткі

Фактары, якія ўплываюць на рэшткавыя эндагенныя прымешкі, хуткасць экстракцыі. Для чыстых узораў, такіх як клеткі, можна атрымаць здавальняючыя вынікі практычна любым метадам ачысткі.Але для многіх іншых узораў, асабліва з высокім узроўнем прымешак, такіх як расліны, печань, бактэрыі і г.д., выбар падыходнага метаду ачысткі мае вырашальнае значэнне.Метад цэнтрабежнай ачысткі ў калонцы мае высокую хуткасць экстракцыі і можа эфектыўна выдаляць прымешкі, якія ўплываюць на наступную ферментатыўную рэакцыю РНК, але гэта дорага (Foregene можа прапанаваць эканамічна эфектыўныя наборы, больш падрабязна націсніцетут);выкарыстанне эканамічных і класічных метадаў ачысткі, такіх як асаджэнне LiCl, таксама можа атрымаць здавальняючыя вынікі, але час працы доўгі..

«Тры дысцыпліны і восем увагі» для экстракцыі РНК

Дысцыпліна 1:Пакласці канец заражэнню экзагеннымі ферментамі.

Заўвага 1:Строга насіць маскі і пальчаткі.

Заўвага 2:Цэнтрыфужныя прабіркі, галоўкі наканечнікаў, стрыжні піпетак, рэзервуары для электрафарэзу і эксперыментальныя лаўкі, задзейнічаныя ў эксперыменце, павінны быць старанна ўтылізаваны.

Заўвага 3:Рэагенты/растворы, якія ўдзельнічаюць у эксперыменце, асабліва вада, не павінны ўтрымліваць РНКазы.

Дысцыпліна 2:Блакуюць актыўнасць эндагенных ферментаў

Заўвага 4:Выберыце прыдатны метад гамагенізацыі.

Заўвага 5:Выберыце прыдатны лизат.

Заўвага 6:Кантралюйце пачатковую колькасць пробы.

Дысцыпліна 3:Удакладніце мэту здабычы

Заўвага 7:Калі любая сістэма лізата набліжаецца да максімальнай пачатковай колькасці ўзору, узровень поспеху экстракцыі рэзка падае.

Заўвага 8:Адзіным эканамічным крытэрыем паспяховай экстракцыі РНК з'яўляецца поспех у наступных эксперыментах, а не выхад.

10 лепшых крыніц заражэння РНКазой

1. Пальцы з'яўляюцца першай крыніцай экзагенных ферментаў, таму пальчаткі трэба насіць і часта мяняць.Акрамя таго, маскі таксама неабходна насіць, таму што дыханне таксама з'яўляецца важнай крыніцай ферментаў.Дадатковай перавагай нашэння маскі-пальчаткі з'яўляецца абарона эксперыментатара.

2. Наканечнікі піпетак, цэнтрыфужныя прабіркі, піпеткі – РНКазу нельга дэактываваць адной толькі стэрылізацыяй, таму наканечнікі піпетак і цэнтрыфужныя прабіркі трэба апрацоўваць DEPC, нават калі яны пазначаны як апрацаваныя DEPC.Лепш за ўсё карыстацца спецыяльнай піпеткай, перад ужываннем яе, асабліва стрыжань, працерці 75% спіртавой ватай;акрамя таго, не выкарыстоўвайце сродак для зняцця галоўкі.

3. Вада/буфер не павінны быць забруджаныя РНКазой.

4. Прынамсі, тэставы стол трэба працерці ватовымі шарыкамі з 75% спіртам.

5.Эндагенная РНКаза Усе тканіны ўтрымліваюць эндагенныя ферменты, таму хуткае замарожванне тканін вадкім азотам з'яўляецца лепшым спосабам паменшыць дэградацыю.Метад захоўвання/драбнення вадкім азотам сапраўды нязручны, але гэта адзіны спосаб для тканін з высокім узроўнем эндагенных ферментаў.

6. Узоры РНК Прадукты экстракцыі РНК могуць утрымліваць сляды забруджвання РНКазой.

7. Экстракцыя плазміды. Для экстракцыі плазміды часта выкарыстоўваецца Рназа для дэградацыі РНК, а рэшткавая Рназа павінна быць расшчаплена Пратэіназай К і экстрагавана з дапамогай ЧКВ.

8. Захоўванне РНК Нават калі яна захоўваецца пры нізкай тэмпературы, слядовыя колькасці РНКазы прывядуць да дэградацыі РНК.Найлепшым рашэннем для доўгатэрміновага захавання РНК з'яўляецца солевая/спіртавая завісь, таму што пры нізкіх тэмпературах спірт душыць усю ферментатыўную актыўнасць.

9. Калі катыёны (Ca, Mg) утрымліваюць гэтыя іёны, награванне пры 80°C на працягу 5 хвілін прывядзе да расшчаплення РНК, таму, калі неабходна нагрэць РНК, кансервавальны раствор павінен утрымліваць хелатирующий агент (1мМ цытрат натрыю, pH 6,4).

10. Ферменты, якія выкарыстоўваюцца ў наступных эксперыментах, могуць быць забруджаныя РНКазой.

10 парад па экстракцыі РНК

1: Хутка прадухіліць актыўнасць РНКазы.Узоры хутка замарожваюцца пасля збору, і РНКаза інактывуецца хуткай працай падчас лізісу.

2: Выберыце адпаведны метад экстракцыі для тканіны з высокім утрыманнем рибозима, а для тлушчавай тканіны лепш выкарыстоўваць метад, які змяшчае фенол.

3: Якасць прагназавання патрабуе Northern, стварэнне бібліятэкі кДНК патрабуе высокай цэласнасці, а RT-PCR і RPA (аналіз абароны ад рыбануклеазы) не патрабуюць высокай цэласнасці.RT-PCR патрабуе высокай чысціні (рэшткі інгібітараў ферментаў).

4: Дбайная гамагенізацыя з'яўляецца ключом да павышэння ўраджайнасці і зніжэння дэградацыі.

5: Праверце цэласнасць выяўлення электрафарэзу РНК, 28S: 18S = 2: 1 з'яўляецца поўным знакам, 1: 1 таксама прымальна для большасці эксперыментаў.

6: Выдаленне ДНК для RT-PCR, масіўнага аналізу Для выдалення ДНК лепш за ўсё выкарыстоўваць Dnase I.

7: Паменшыце забруджванне экзагеннымі ферментамі - ферменты нельга імпартаваць звонку.

8: Пры канцэнтрацыі нуклеінавай кіслаты з нізкай канцэнтрацыяй трэба дадаць рэагент для суасаджэння.Але для прадухілення забруджвання соосадителя, які змяшчае ферменты і ДНК.

9: Старанна растварыць РНК, пры неабходнасці нагрэць пры 65C на працягу 5 хвілін.

прыдатны спосаб захоўвання

Непрацяглы час можа захоўвацца пры тэмпературы -20С, працяглы - пры -80С.Першы крок да павышэння выхаду РНК - гэта ўсведамленне таго, што ўтрыманне РНК у розных узорах моцна адрозніваецца.Высокае ўтрыманне (2-4 мкг/мг), такое як печань, падстраўнікавая жалеза, сэрца, сярэдняе ўтрыманне (0,05-2 мкг/мг), такое як мозг, эмбрыён, ныркі, лёгкія, вілачкавай залозы, яечнікі, нізкае ўтрыманне (<0,05 мкг/мг) мг), такое як мачавы пузыр, косці, тлушч.

1: Лізіс клетак для вызвалення РН - калі РНК не вызваляецца, выхад будзе зніжаны.Электрычная гамагенізацыя працуе лепш, чым іншыя метады гамагенізацыі, але, магчыма, яе спатрэбіцца спалучаць з іншымі метадамі, такімі як заціранне вадкім азотам, ферментатыўнае расшчапленне (лізацым/літыказа)

2: Аптымізацыя метаду экстракцыі.Самыя вялікія праблемы метадаў на аснове фенолу - гэта няпоўная стратыфікацыя і частковая страта РНК (супернатант немагчыма цалкам выдаліць).Няпоўная стратыфікацыя звязана з высокім утрыманнем нуклеінавых кіслот і бялку, што можа быць вырашана шляхам павелічэння колькасці выкарыстоўванага лізата або памяншэння колькасці ўзору.У тлушчавую тканіну быў дададзены этап экстракцыі хлараформам.Страту РНК можна паменшыць зваротнай адпампоўкай або выдаленнем арганічнага пласта з наступным цэнтрыфугаваннем.Самая вялікая праблема з метадамі цэнтрыфугавання ў калонцы - лішак пробы.

Класічныя парады па здабычы

1. Ачыстка фенолам: дадайце роўны аб'ём 1:1 фенол/хлараформ і інтэнсіўна змешвайце на працягу 1-2 хвілін.Цэнтрыфугуйце на высокай хуткасці на працягу 2 хвілін.Асцярожна выдаляюць супернатант (80-90%).Ніколі не даходзьце да сярэдняга пласта.Роўны аб'ём рэакцыйнага раствора можа быць дададзены ў фенол/хлараформ і выдалены супернатант.Дзве супернатанты можна змяшаць разам для асаджэння нуклеінавых кіслот для павышэння ўраджаю.Не будзьце занадта далікатнымі пры змешванні і не спрабуйце выдаліць увесь супернатант.

2. Прамыванне 70-80% этанолам: падчас прамывання нуклеінавая кіслата павінна быць падвешана, каб пераканацца, што рэшткі солі змываюцца.У той жа час, адразу пасля зліву этанолу, центрифугируйте на высокай хуткасці на працягу некалькіх секунд, а затым выдаліце ​​піпеткай рэшткі этанолу.Растварыць пасля адстойвання пры пакаёвай тэмпературы на працягу 5-10 хвілін.

11. Выманне спецыяльных арганізацый

1. Фіброзная тканіна: ключом да экстракцыі РНК з фібрознай тканіны, такой як сардэчная/шкілетная цягліца, з'яўляецца поўнае разбурэнне тканіны.Гэтыя тканіны маюць нізкую шчыльнасць клетак, таму колькасць РНК на адзінку масы тканіны нізкая, і лепш за ўсё выкарыстоўваць як мага большую зыходную колькасць.Не забудзьцеся старанна расцерці сурвэтку ва ўмовах замарожвання.

2. Тканіны з высокім утрыманнем бялку/тлушчаў: высокае ўтрыманне мазгавога/расліннага тлушчу.Пасля экстракцыі PCI супернатант змяшчае белыя шматкі.Супернатант неабходна реэкстрагировать хлараформам.

3. Тканіны з высокім утрыманнем нуклеінавых кіслот/рыбазімаў: селязёнка/тымус маюць высокае ўтрыманне нуклеінавых кіслот і рыбазімаў.Драбненне тканіны ва ўмовах замарожвання з наступнай хуткай гамагенізацыяй можа эфектыўна інактываваць рыбазімы.Аднак, калі лізат занадта глейкі (з-за высокага ўтрымання нуклеінавых кіслот), экстракцыя PCI не зможа эфектыўна стратыфікаваць;даданне больш лизата можа вырашыць гэтую праблему.Множныя экстракцыі PCI могуць выдаліць больш рэшткаў ДНК.Калі адразу пасля дадання спірту ўтворыцца белы асадак, гэта сведчыць аб забруджванні ДНК.Паўторная экстракцыя кіслотным PCI пасля растварэння можа выдаліць забруджванне ДНК.

4. Раслінная тканіна: раслінная тканіна больш складаная, чым жывёльная.Як правіла, расліны здрабняюць ва ўмовах вадкага азоту, таму дэградацыя РНК эндагеннымі ферментамі незвычайная.Калі праблема дэградацыі не вырашана, гэта амаль напэўна выклікана прымешкамі, якія змяшчаюцца ва ўзоры.Прымешкі, якія змяшчаюцца ў многіх раслінах, прыводзяць да рэшткаў, і прычынай рэшткаў часта з'яўляецца тое, што гэтыя прымешкі маюць некаторае падабенства з РНК: вы выпадаеце ў асадак, і я асаджаю, і вы адсарбуеце, і я адсарбую.Гэтыя характарыстыкі вызначаюць, што яны з'яўляюцца вельмі моцнымі інгібітарамі ферментаў.

У цяперашні час камерцыйныя рэагенты для экстракцыі РНК могуць быць адаптаваны практычна да ўсіх тканак жывёл з невялікімі карэкціроўкамі, але ёсць некалькі камерцыйных рэагентаў для экстракцыі РНК, якія падыходзяць для большасці тканін раслін.На шчасце, Foregene можа даць спецыяльныянаборы для экстракцыі РНК раслін, мы маемНабор для вылучэння агульнай РНК раслін, Набор для вылучэння агульнай РНК раслін Plus.Апошні спецыяльна распрацаваны для раслін з высокім утрыманнем поліцукрыдаў і поліфенолы.Для экстракцыі РНК водгукі карыстальнікаў лабараторыі асабліва добрыя.

12. Эфект замарожвання і адтавання ўзору. Замарожаны ўзор можа быць большым, і яго неабходна разрэзаць перад выкарыстаннем для экстракцыі РНК.Узоры, як правіла, плавяцца (магчыма, часткова) падчас рэзкі.Замарожаныя ўзоры, магчыма, спатрэбіцца ўзважыць перад экстракцыяй РНК, і падчас гэтага працэсу абавязкова адбудзецца размарожванне.Часам адтаванне ўзору таксама адбываецца ў працэсе памолу вадкім азотам;або замарожаны ўзор непасрэдна дадаецца ў лізат без драбнення вадкім азотам, і адтаванне абавязкова адбудзецца да поўнай гамагенізацыі.Эксперыменты паказалі, што замарожаная тканіна больш схільная дэградацыі РНК падчас адтавання, чым свежая тканіна.Верагодная прычына: працэс замарожвання-адтавання разбурае структуры ўнутры клеткі, палягчаючы эндагенным ферментам непасрэдны кантакт з РНК.

13. Ацэнка якасці РНК. Звычайна электрафарэз выкарыстоўваецца для ацэнкі цэласнасці РНК, а A260/A280 - для ацэнкі чысціні РНК.У тэорыі непашкоджаная РНК мае суадносіны 28S:18S = 2,7:1, і большасць дадзеных падкрэслівае суадносіны 28S:18S = 2:1.Справа ў тым, што практычна ні адна РНК, вынятая з узораў, акрамя клетак, не знаходзіцца ў суадносінах 2:1 (гэта было атрымана з дапамогай біяаналізатара Agilent).

На вынікі электрафарэзу РНК уплывае мноства фактараў, у тым ліку другасная структура, умовы электрафарэзу, загрузка ўзору, ступень насычэння EB і г. д. Выкарыстоўвайце натыўны электрафарэз для выяўлення РНК і выкарыстоўвайце маркер ДНК у якасці кантролю.Калі 28S пры 2 кб і 18S пры 0,9 кб чыстыя, а 28S: 18S > 1, цэласнасць можа адпавядаць патрабаванням большасці наступных эксперыментаў.

A260/A280 - гэта паказчык, які выклікаў шмат блытаніны.Перш за ўсё, неабходна ўдакладніць першапачатковае значэнне гэтага паказчыка для нуклеінавых кіслот: чыстая РНК, яе А260/280 = каля 2,0.Чыстая РНК - гэта "прычына", а A260/A280 = 2 - "следства".Цяпер усе выкарыстоўваюць A260/A280 як «прычыну», думаючы, што «калі A260/A280 = 2, то РНК чыстая», што, натуральна, прыводзіць да блытаніны.

Калі вы зацікаўлены, вы можаце дадаць трохі рэагента, які часта выкарыстоўваецца пры экстракцыі, напрыклад, фенолу, гуанідынізатыяцыяната, ПЭГ і г.д., у ваш узор РНК, а затым вымераць суадносіны A260/A280.Рэальнасць такая, што многія рэагенты, якія выкарыстоўваюцца для экстракцыі РНК, а таксама многія прымешкі ва ўзоры паглынаюць вакол A260 і A280, уплываючы на ​​A260/A280.

Найбольш павучальным падыходам на дадзены момант з'яўляецца сканаванне узораў РНК у дыяпазоне 200-300 нм.Крывая чыстай РНК мае наступныя характарыстыкі: крывая гладкая, A230 і A260 - дзве кропкі перагіну, A300 блізкая да 0, A260/A280 = каля 2,0 і A260/A230 = каля 2,0.Калі дадзеныя сканавання недаступныя, суадносіны A260/A230 таксама неабходна вызначыць, паколькі гэта стаўленне больш адчувальна да пераносу ўсіх прымешак, якія ўплываюць на ферментатыўную рэакцыю.Улічвайце лінейны дыяпазон прылады (0,1–0,5 для А260).

Ёсць два іншыя карысныя з'явы: стаўленне будзе прыкладна на 0,3 ніжэй, калі A260/A280 вымяраецца ў вадзе;у той час як стаўленне, вымеранае ў 10 мм ЭДТА, прыкладна на 0,2 вышэй, чым у 1 мм ЭДТА.

Спадарожныя тавары:

Кітайскі вытворца і пастаўшчык камплекта для ізаляцыі агульнай РНК раслін |Foregene (foreivd.com)

Серыя ізаляцыі РНК Пастаўшчыкі і фабрыка |Кітайскія вытворцы серыі ізаляцыі РНК (foreivd.com)

Серыя выдзялення РНК – Foregene Co., Ltd. (foreivd.com)