Уводзіны:

Малекулы РНК могуць інтэнсіўна ўзаемадзейнічаць з іншымі біялагічнымі малекуламі, такімі як бялок, ДНК і РНК, і, такім чынам, існаваць у клетках і арганізмах у выглядзе макрамалекулярных комплексаў.Сярод іх РНК-бялковыя комплексы існаванне і функцыя РНК Адна з важных формаў.Выцягванне РНК з'яўляецца класічным метадам для скрынінга і ідэнтыфікацыі малекул РНК, асабліва ўзаемадзейнічаючых бялкоў малекул lncRNA, і прызнаны большасцю даследчыкаў і міжнароднымі аўтарытэтнымі акадэмічнымі часопісамі.Сёння FORREGENE падзеліцца з вамі эксперыментальным прынцыпам і тэхнічным працэсам выцягвання РНК, магчыма, вы зможаце ім скарыстацца

1. Эксперыментальны прынцып тэхналогіі падзення РНК:

Транскрыпцыя in vitro і сінтэз пазначаных біятынам мэтавых lncRNA або фрагментаў lncRNA (уключаючы фрагменты РНК, якія выкарыстоўваюцца ў якасці станоўчага і адмоўнага кантролю), і інкубаваць з клеткавымі экстрактамі;выкарыстоўвайце замацаваныя на авідыне магнітныя шарыкі для збору комплексаў РНК-бялок або РНК-РНК. Пасля дбайнага прамывання комплекс элюіруюць.Пры выяўленні малекулы бялку-мішэні, якая ўзаемадзейнічае з lncRNA, правядзіце электрафарэз бялку на прадукце выцягвання РНК, вызначце бялок-мішэнь афарбоўкай срэбрам і разрэжце гель для мас-спектраметрыі;таксама непасрэдна правесці праверку Вестэрн-блот на выпадаючым прадукце;у выпадку выяўлення. Для малекул-мішэняў РНК, якія ўзаемадзейнічаюць з lncRNA, прадукты выцягвання РНК падвяргаюцца экстракцыі РНК і праводзіцца спецыфічнае выяўленне qRT-PCR.

2. Эксперыментальны працэс тэхналогіі падзення РНК:

3. Тэхнічнае абслугоўванне падзення РНК FOREGENE:

Культура клетак

Падрыхтоўка клеткавага агульнага/ядзернага/плазменнага бялковага экстракта

Эксперымент па падзенні РНК

Электрафарэз SDS-PAGE, афарбоўка срэбрам

Мас-спектраметрыя і ВБ эксперыменты

Эксперыментальная справаздача

4. Эксперыментальны выпадак

На наступным малюнку паказаны вынікі выяўлення РНК FJ Bio-Bio і электрафарэзу SDS-PAGE, у якіх чырвоная стрэлка пазначае паласу розніцы:

Даследчая група прафесара Сун Сюй з Універсітэта Сычуань назапасіла 15 гадоў доўгатэрміновага назапашвання ў галіне даследаванняў lncRNA.Foregene Bio і даследчая група прафесара Сун Сю супрацоўнічалі, каб запусціць тэхналогію падзення РНК lncRNA, якая дасць вам здавальняючы вынік у вашым эксперыменце.