Патагенныя мікраарганізмы - гэта мікраарганізмы, якія могуць пранікаць у арганізм чалавека, выклікаць інфекцыі і нават інфекцыйныя захворванні, альбо ўзбуджальнікі.Сярод хваробатворных мікраарганізмаў найбольш шкоднымі з'яўляюцца бактэрыі і вірусы.

Інфекцыя - адна з асноўных прычын захваральнасці і смерці людзей.У пачатку 20-га стагоддзя адкрыццё антымікробных прэпаратаў змяніла сучасную медыцыну, даўшы людзям «зброю» для барацьбы з інфекцыямі, а таксама зрабіўшы магчымымі аперацыі, трансплантацыю органаў і лячэнне рака.Аднак існуе мноства тыпаў узбуджальнікаў, якія выклікаюць інфекцыйныя захворванні, у тым ліку вірусы, бактэрыі, грыбкі і іншыя мікраарганізмы.З мэтай паляпшэння дыягностыкі і лячэння розных захворванняў, аховы здароўя людзей

Здароўе патрабуе больш дакладных і хуткіх метадаў клінічнага тэставання.Такім чынам, што такое мікрабіялагічныя тэхналогіі выяўлення?

01 Традыцыйны метад выяўлення

У працэсе традыцыйнага выяўлення патагенных мікраарганізмаў большасць з іх неабходна афарбаваць, пасевіць і на гэтай аснове правесці біялагічную ідэнтыфікацыю, каб можна было ідэнтыфікаваць розныя тыпы мікраарганізмаў, а значэнне выяўлення высокае.Традыцыйныя метады выяўлення ў асноўным ўключаюць мікраскапію мазка, сепарацыйную культуру і біяхімічную рэакцыю, а таксама культуру тканкавых клетак.

1 Мікраскапія мазка

Патагенныя мікраарганізмы маюць невялікія памеры і большасць з іх бескаляровыя і напаўпразрыстыя.Пасля афарбоўвання іх можна выкарыстоўваць для назірання іх памеру, формы, размяшчэння і г.д. з дапамогай мікраскопа.Мікраскапічнае даследаванне прамога афарбоўвання мазка простае і хуткае, і яно па-ранейшаму дастасавальна да тых патагенных мікробных інфекцый з асаблівымі формамі, такім як гонококковая інфекцыя, Mycobacterium tuberculosis, спірохетальная інфекцыя і г.д., для ранняй папярэдняй дыягностыкі.Метад прамога фотомикроскопического даследавання больш хуткі, і можа выкарыстоўвацца для візуальнага агляду узбуджальнікаў з дапамогай спецыяльных бланкаў.Гэта не патрабуе спецыяльных інструментаў і абсталявання.Ён па-ранейшаму з'яўляецца вельмі важным сродкам выяўлення патагенных мікраарганізмаў у базавых лабараторыях.

2 Падзел культуры і біяхімічная рэакцыя

Раздзяляльная культура ў асноўным выкарыстоўваецца, калі ёсць шмат відаў бактэрый і адну з іх трэба аддзяліць.Ён у асноўным выкарыстоўваецца ў мокроце, фекаліях, крыві, вадкасцях арганізма і г. д. Паколькі бактэрыі растуць і размнажаюцца на працягу доўгага часу, гэты метад тэставання патрабуе пэўнага часу., І не можа быць апрацавана серыямі, таму медыцына працягвае праводзіць даследаванні па гэтым пытанні, выкарыстоўваючы аўтаматызаванае навучанне і ідэнтыфікацыйнае абсталяванне для паляпшэння традыцыйных метадаў навучання і павышэння дакладнасці выяўлення.

3 Культура клетак тканіны

Клеткі тканін у асноўным ўключаюць хламідыі, вірусы і ріккетсіі.Паколькі тыпы тканкавых клетак у розных узбуджальнікаў розныя, пасля таго, як тканіны выдаляюцца ад патагенных мікраарганізмаў, жывыя клеткі неабходна культываваць з дапамогай субкультуры.Культывуюцца патагенныя мікраарганізмы засяваюць у клеткі тканін для культывавання, каб максімальна паменшыць паталагічныя змены клетак.Акрамя таго, у працэсе культывавання клетак тканін патагенныя мікраарганізмы могуць быць непасрэдна прышчэплены ў адчувальных жывёл, а затым характарыстыкі патагенаў могуць быць правераны ў адпаведнасці са зменамі ў тканінах і органах жывёл.

02 Тэхналогія генетычнага тэставання

Дзякуючы бесперапыннаму ўдасканаленню ўзроўню медыцынскіх тэхналогій у свеце, распрацоўцы і прагрэсу тэхналогіі малекулярна-біялагічнага выяўлення, якая можа эфектыўна ідэнтыфікаваць патагенныя мікраарганізмы, можа таксама палепшыць бягучы статус прымянення знешніх марфалагічных і фізіялагічных характарыстык у традыцыйным працэсе выяўлення, а таксама можа выкарыстоўваць унікальныя гены. Паслядоўнасць фрагментаў ідэнтыфікуе тыпы патагенных мікраарганізмаў, таму тэхналогія генетычнага тэсціравання шырока выкарыстоўваецца ў галіне клінічнага медыцынскага абследавання са сваімі унікальнымі перавагамі.

1 Палімеразная ланцуговая рэакцыя (ПЦР)

Палімеразная ланцуговая рэакцыя (палімеразная ланцуговая рэакцыя, ПЦР) - гэта метад, які выкарыстоўвае вядомыя алігануклеатыдныя праймеры для навядзення і ампліфікацыі невялікай колькасці фрагмента гена, які трэба праверыць у невядомым фрагменце in vitro.Паколькі ПЦР можа ўзмацніць ген, які трэба праверыць, ён асабліва падыходзіць для ранняй дыягностыкі патагеннай інфекцыі, але калі праймеры неспецыфічныя, гэта можа выклікаць ілжывыя спрацоўванні.За апошнія 20 гадоў тэхналогія ПЦР хутка развівалася, і яе надзейнасць паступова павышалася ад ампліфікацыі генаў да кланавання і трансфармацыі генаў і генетычнага аналізу.Гэты метад таксама з'яўляецца асноўным метадам выяўлення новага каранавіруса ў гэтай эпідэміі.

Кампанія Foregene распрацавала набор RT-PCR на аснове тэхналогіі Direct PCR для выяўлення нармальных 2 генаў, 3 генаў і варыянтаў з Вялікабрытаніі, Бразіліі, Паўднёвай Афрыкі і Індыі, лініі B.1.1.7 (Вялікабрытанія), лініі B.1.351 (ZA), лініі B.1.617 (IND) і лініі P.1 (BR), адпаведна.

Тэхналогія 2 Gene Chip

Тэхналогія генных чыпаў адносіцца да выкарыстання тэхналогіі мікрачыпаў для прымацавання фрагментаў ДНК высокай шчыльнасці да цвёрдых паверхняў, такіх як мембраны і шкляныя лісты, у пэўным парадку або размяшчэнні з дапамогай высакахуткаснай робататэхнікі або сінтэзу на месцы.З ДНК-зондамі, пазначанымі ізатопамі або флуарэсцэнцыяй, і з дапамогай прынцыпу камплементарнай гібрыдызацыі была праведзена вялікая колькасць даследчых метадаў, такіх як экспрэсія генаў і маніторынг.Прымяненне тэхналогіі генных чыпаў для дыягностыкі патагенных мікраарганізмаў можа значна скараціць час дыягностыкі.У той жа час ён таксама можа выявіць, ці мае ўзбуджальнік лекавую ўстойлівасць, да якіх лекаў устойлівы і да якіх адчувальны, каб даць рэкамендацыі для клінічных лекаў.Аднак кошт вытворчасці гэтай тэхналогіі адносна высокі, і адчувальнасць выяўлення мікрасхем неабходна палепшыць.Такім чынам, гэтая тэхналогія да гэтага часу выкарыстоўваецца ў лабараторных даследаваннях і не атрымала шырокага прымянення ў клінічнай практыцы.

3 Тэхналогія гібрыдызацыі нуклеінавых кіслот

Гібрыдызацыя нуклеінавых кіслот - гэта працэс, пры якім асобныя ніткі нуклеатыдаў з камплементарнымі паслядоўнасцямі ў патагенных мікраарганізмах зліваюцца ў клетках з адукацыяй гетеродуплексов.Фактарам, які прыводзіць да гібрыдызацыі, з'яўляецца хімічная рэакцыя паміж нуклеінавай кіслатой і зондамі для ідэнтыфікацыі патагенных мікраарганізмаў.У цяперашні час метады паўторнага скрыжавання нуклеінавых кіслот, якія выкарыстоўваюцца для выяўлення патагенных мікраарганізмаў, у асноўным ўключаюць гібрыдызацыю нуклеінавых кіслот in situ і мембранную гібрыдызацыю.Гібрыдызацыя нуклеінавых кіслот in situ адносіцца да гібрыдызацыі нуклеінавых кіслот у клетках патагенаў з пазначанымі зондамі.Мембранная блот-гібрыдызацыя азначае, што пасля таго, як эксперыментатар аддзяляе нуклеінавую кіслату клеткі-патагена, яе ачышчаюць і аб'ядноўваюць з цвёрдай падставай, а затым гібрыдызуюць з уліковым зондам.Тэхналогія гібрыдызацыі ўліку мае перавагі зручнай і хуткай працы і падыходзіць для адчувальных і мэтанакіраваных патагенных мікраарганізмаў.

03 Сералагічныя даследаванні

Сералагічныя даследаванне дазваляе хутка вызначыць патагенныя мікраарганізмы.Асноўным прынцыпам тэхналогіі сералагічныя даследаванняў з'яўляецца выяўленне патагенаў праз вядомыя антыгены і антыцелы ўзбуджальнікаў.У параўнанні з традыцыйным аддзяленнем і культываваннем клетак этапы сералагічныя аналізу простыя.Звычайна выкарыстоўваюцца метады выяўлення ўключаюць рэакцыю латекс-аглютынацыі і тэхналогію імунаферментнага аналізу.Прымяненне тэхналогіі імунаферментнага аналізу дазваляе значна павысіць адчувальнасць і спецыфічнасць сералагічныя тэставання.Ён можа не толькі выявіць антыген у доследным узоры, але і выявіць кампанент антыцелаў.

У верасні 2020 года Амерыканскае таварыства інфекцыйных хвароб (IDSA) выпусціла рэкамендацыі па сералагічныя аналізу для дыягностыкі COVID-19.

04 Імуналагічныя даследаванні

Імуналагічнае выяўленне таксама называюць тэхналогіяй імунамагнітнага падзелу шарыкаў.Гэтая тэхналогія можа падзяліць патагенныя і непатагенныя бактэрыі ў патагенных.Асноўны прынцып: выкарыстанне мікрасфер з магнітных шарыкаў для падзелу аднаго антыгена або некалькіх тыпаў пэўных узбуджальнікаў.Антыгены збіраюцца разам, і патагенныя бактэрыі аддзяляюцца ад узбуджальнікаў праз рэакцыю антыгеннага цела і знешняга магнітнага поля.

Гарачыя кропкі выяўлення ўзбуджальнікаў - выяўленне ўзбуджальнікаў дыхальных шляхоў

«Набор для выяўлення патагенных бактэрый дыхальнай сістэмы» ад Foregene знаходзіцца ў стадыі распрацоўкі.Набор можа выяўляць 15 відаў патагенных бактэрый у мокроце без неабходнасці ачысткі нуклеінавай кіслаты ў мокроце.Што тычыцца эфектыўнасці, гэта скарачае першапачатковыя 3-5 дзён да 1,5 гадзін.