Набор для вылучэння віруснай ДНК і РНК Наборы для падрыхтоўкі ачысткі да экстракцыі віруснай ДНК і РНК
Тэхнічныя характарыстыкі
50 Preps, 200 Preps
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit выкарыстоўвае спінавую калонку і формулу, распрацаваныя Foregene, якія могуць эфектыўна здабываць вірусную РНК высокай чысціні і высокай якасці з такіх узораў, як плазма, сыроватка, бясклетачная вадкасць арганізма і супернатант клетачнай культуры.У набор спецыяльна дадаецца лінейны акрыламід, які можа лёгка захопліваць невялікія колькасці РНК з узораў.RNA-Only Column можа эфектыўна звязваць РНК.Набор можа апрацоўваць вялікую колькасць узораў адначасова.
Увесь набор не ўтрымлівае РНКазы, таму вычышчаная РНК не будзе дэградаваць.Буферы viRW1 і буферы viRW2 могуць гарантаваць, што атрыманая вірусная нуклеінавая кіслата не змяшчае бялку, нуклеазы або іншых прымешак, што можа выкарыстоўвацца непасрэдна для далейшых эксперыментаў па малекулярнай біялогіі.
Складнікі камплекта
| Лінейны акрыламід |
| Буферныя ДХО |
| Буфер RW1, буфер RW2 |
| ddH без РНКазы2O |
| Слупок ДНК/РНК |
| Інструкцыя |
Асаблівасці і перавагі
■ Праца пры пакаёвай тэмпературы (15-25 ℃) на працягу ўсяго працэсу, без ледзяной ванны і нізкатэмпературнага цэнтрыфугавання.
■ Поўны набор без РНКазы, не трэба турбавацца аб дэградацыі РНК.
■ Высокі выхад нуклеінавых кіслот: калонка толькі для ДНК/РНК і ўнікальная формула могуць эфектыўна ачышчаць ДНК і РНК.
■ Вялікая магутнасць апрацоўкі ўзораў: кожны раз можна апрацоўваць да 200 мкл узораў.
■ Высокая хуткасць: просты ў эксплуатацыі і можа быць выкананы на працягу 20 хвілін.
■ Бяспека: арганічны рэагент не патрабуецца.
■ Высокая якасць: вычышчаныя фрагменты РНК маюць высокую чысціню, не ўтрымліваюць бялку і іншых прымешак і могуць знайсці розныя эксперыментальныя магчымасці.
Прыкладанне камплекта
Ён падыходзіць для экстракцыі і ачысткі віруснай нуклеінавай кіслаты ў такіх узорах, як плазма, сыроватка, бясклетачная вадкасць арганізма і супернатант культуры клетак.
Працоўны працэс
Дыяграма
Захоўванне і тэрмін прыдатнасці
■ Гэты набор можа захоўвацца 24 месяцы ў сухіх умовах пры пакаёвай тэмпературы (15-25 ℃);калі яго трэба захоўваць на працягу больш доўгага часу, яго можна захоўваць пры тэмпературы 2–8 ℃.
■ Раствор лінейнага акрыламіду можна захоўваць пры пакаёвай тэмпературы на працягу 7 дзён;пасля атрымання камплекта дастаньце яго і захоўвайце пры -20°C.
■ Пасля дадання лінейнага акрыламіду ў буфер DRL яго можна захоўваць пры 2-8°C да 48 гадзін.Калі ласка, выкарыстоўвайце гатовае рашэнне.
Кіраўніцтва па аналізе праблем
Ніжэй прыведзены аналіз праблем, з якімі можна сутыкнуцца пры вылучэнні віруснай ДНК/РНК, у надзеі быць карысным для вашых эксперыментаў.Акрамя таго, для іншых эксперыментальных або тэхнічных праблем, акрамя інструкцый па эксплуатацыі і аналізу праблем, мы прапануем спецыяльную тэхнічную падтрымку, каб дапамагчы вам.Калі ў вас ёсць якія-небудзь патрэбы, калі ласка, звяжыцеся з намі: 028-83360257 або па электроннай пошце:
Tech@foregene.com.
Няма экстракцыі нуклеінавых кіслот або нізкі выхад нуклеінавых кіслот
Звычайна існуе мноства фактараў, якія ўплываюць на эфектыўнасць аднаўлення, напрыклад: утрыманне нуклеінавых кіслот у пробе, метад працы, аб'ём элюіравання і г.д.
Аналіз агульных прычын:
1. Падчас працэдуры праводзілі ледзяную ванну або цэнтрыфугаванне пры нізкай тэмпературы (4°C).
Прапанова: Працуйце пры пакаёвай тэмпературы (15-25°C) на працягу ўсяго працэсу, без ледзяной ванны і нізкатэмпературнага цэнтрыфугавання.
2. Узор захоўваўся няправільна або ўзор захоўваўся занадта доўга.
Рэкамендацыя: Захоўвайце ўзоры пры -80°C і пазбягайце паўторнага замарожвання і адтавання;паспрабуйце выкарыстоўваць свежесобранные ўзоры для экстракцыі нуклеінавых кіслот.
3. Недастатковы лізіс пробы.
Рэкамендацыя: упэўніцеся, што ўзор і працоўны раствор для лізісу старанна перамешаны і інкубаваны пры пакаёвай тэмпературы (15-25°C) на працягу 10 хвілін.
4. Няправільнае даданне элюента.
Прапанова: пераканайцеся, што ddH2O без РНКазы дадаецца па кроплях у сярэдзіну мембраны ачышчальнай калонкі і не кідайце яго на кольца ачышчальнай калонкі.
5. Правільны аб'ём абсалютнага этанолу не быў дададзены ў буфер RW2.
Прапанова: выконвайце інструкцыі, дадайце патрэбны аб'ём абсалютнага этанолу ў буфер RW2 і добра змяшайце перад выкарыстаннем набору.
6. Неадпаведны аб'ём выбаркі.
Прапанова: 200 мкл пробы апрацоўваецца на кожныя 500 мкл буфера DRL.Празмерная апрацоўка ўзору прывядзе да зніжэння выхаду экстракцыі нуклеінавых кіслот.
7. Неадпаведны аб'ём элюіравання або няпоўнае элюіраванне.
Рэкамендацыя: аб'ём элюента ачышчальнай калонкі складае 30-50 мкл;калі эфект элюіравання не з'яўляецца здавальняючым, рэкамендуецца падоўжыць час пры пакаёвай тэмпературы пасля дадання папярэдне нагрэтага ddH2O без РНКазы, напрыклад, на 5-10 хвілін.
8. Этанол застаецца на калонцы пасля прамывання буферам RW2.
Прапанова: калі пасля цэнтрыфугавання з буферам RW2 на працягу 2 хвілін застаецца этанол, пасля цэнтрыфугавання калонку можна паставіць пры пакаёвай тэмпературы на 5 хвілін, каб цалкам выдаліць рэшткі этанолу.
Вычышчаная нуклеінавая кіслата раскладаецца
Якасць вычышчанай нуклеінавай кіслаты залежыць ад захаванасці ўзору, заражэння РНКазой, працы і іншых фактараў.Аналіз агульных прычын:
1. Сабраныя пробы несвоечасова захоўваліся.
Прапанова: калі ўзор не быў выкарыстаны своечасова пасля збору, неадкладна захоўвайце яго пры -80°C пры нізкай тэмпературы.Для экстракцыі РНК паспрабуйце выкарыстоўваць толькі што сабраныя ўзоры.
2. Збярыце ўзоры і неаднаразова замарожвайце і размарожвайце.
Прапанова: пазбягайце замарожвання і размарожвання (не больш за адзін раз) падчас збору і захоўвання ўзораў, у адваротным выпадку выхад нуклеінавых кіслот будзе зніжаны.
3. РНКазу ўводзяць у аперацыйнай або не надзяваюць аднаразовыя пальчаткі, маскі і інш.
Рэкамендацыя: Эксперыменты па экстракцыі РНК лепш за ўсё праводзіць у асобнай аперацыйнай РНК, а лабараторны стол трэба прыбраць перад эксперыментам.
Апранайце аднаразовыя пальчаткі і маскі падчас эксперыменту, каб у найбольшай ступені пазбегнуць дэградацыі РНК, выкліканай увядзеннем РНКазы.
4. Рэагент быў забруджаны РНКазой падчас выкарыстання.
Рэкамендацыя: заменіце новым наборам для выдзялення віруснай ДНК/РНК для адпаведных эксперыментаў.
5. Цэнтрыфужныя прабіркі і наканечнікі піпетак, якія выкарыстоўваюцца для маніпуляцый РНК, забруджаныя РНКазой.
Прапанова: пераканайцеся, што цэнтрыфужныя прабіркі, наканечнікі піпетак, піпеткі і г.д., якія выкарыстоўваюцца для экстракцыі РНК, не ўтрымліваюць РНКазы.
Вычышчаная нуклеінавая кіслата ўплывае на далейшыя эксперыменты
ДНК і РНК, ачышчаныя ачышчальнай калонкай, калі ўтрыманне іёнаў солі і бялку занадта высокае, гэта паўплывае на наступныя эксперыменты, такія як: ПЦР-ампліфікацыя, зваротная транскрыпцыя і г.д.
1. Элюяваная ДНК і РНК маюць рэшткавыя іёны солі.
Прапанова: пераканайцеся, што правільны аб'ём абсалютнага этанолу дададзены ў буфер RW2, і двойчы прамыйце ачышчальную калонку пры хуткасці цэнтрыфугавання, указанай у інструкцыі па эксплуатацыі;Правядзіце цэнтрыфугаванне, каб звесці да мінімуму забруджванне іёнамі солі.
2. Вымытыя ДНК і РНК маюць рэшткі этанолу.
Прапанова: пасля пацверджання прамывання буферам RW2 правядзіце цэнтрыфугаванне пустых прабірак на хуткасці цэнтрыфугавання, указанай у інструкцыі па эксплуатацыі;калі ўсё яшчэ ёсць рэшткі этанолу, вы можаце центрифугировать пустую прабірку, а затым змясціць яе пры пакаёвай тэмпературы на 5 хвілін, каб выдаліць рэшткі этанолу ў найбольшай ступені.
Інструкцыі па эксплуатацыі:
Кіраўніцтва па выкарыстанні набору для выдзялення віруснай ДНК і РНК
