• facebook
  • Linkedin
  • youtube

Лабараторнае даследаванне пачынаецца са збору ўзораў, і збор узораў лягчэй за ўсё не заўважыць.Самае важнае для збору проб - гэта выбраць правільны тып пробы, выкарыстоўваць адпаведныя інструменты для ўзяцця проб і ажыццявіць разумную транспарціроўку і апрацоўку.

I.Тып выбаркі

Агульныя тыпы ўзораў наступныя:

dsafgsd

Спосаб адбору пробаў можна спасылацца на тэхнічныя ўмовы экалагічнага маніторынгу новага каранавіруса на рынку гандлю сельгаспрадукцыяй (базару)»:

1. Узоры мазкоў з мазкоў з горла, рук, адзення і іншых прадметаў практыкуючых лекараў: патрабуецца выкарыстоўваць раствор для захавання вірусаў у прабірцы для ўзяцця вірусаў і цалкам пранікнуць у ватовыя тампоны для адбору пробаў.Паверхню грунта) наносяць паўторна і прамываюць больш за 3 разы.Пры гэтым неабходна вырабляць шматкропкавы размеркаваны адбор проб на паверхні адбіранага аб'екта.

2. Узоры мазкоў з паверхні харчовых прадуктаў: ​​узоры харчовых прадуктаў нельга збіраць непасрэдна.Ежу, якую трэба сабраць, трэба старанна аддзяліць і захоўваць у чыстым пакеце для ўзяцця проб перад зборам проб мазкоў.Неабходна выкарыстоўваць раствор для кансервавання вірусаў у прабірцы для ўзяцця вірусаў, пасля поўнага прамочвання ватовага тампона для адбору пробаў, каб неаднаразова нашмароўваць і прамываць паверхню ўзору харчовых прадуктаў, які трэба забраць, больш за 3 разы.Пры гэтым неабходна выканаць шматкропкавы размеркаваны адбор на паверхні ўзору.

3. Узоры сцёкавых вод: у адпаведнасці з размеркаваннем дрэнажнай сістэмы на рынку абярыце 2-3 месцы адбору пробаў сцёкавых вод, арыентуючыся на збор унутранай трубаправоднай сеткі, унізе ад напрамку патоку вады або на злучэнні з гарадской трубаправоднай сеткай.Каб сабраць узор тампона, апусціце яго ў сцёкавую ваду з дапамогай ватовага тампона для адбору пробаў, каб ён паглынуў сцёкавыя вады, і прамыйце яго ў трубцы для ўзяцця проб больш за 3 разы.Для збору проб сцёкавых вод выкарыстоўвайце поліэтыленавыя пластыкавыя бутэлькі для збору пробаў сцёкавых вод аб'ёмам 30-500 мл;для збору сцёкавых вод аб'ёмам больш за 500 мл можна выкарыстоўваць поліэтыленавыя пластыкавыя вёдры або спецыяльнае абсталяванне для ўзбагачэння вады на месцы.Пры гэтым неабходна правесці шматкропкавы размеркаваны адбор проб для месца адбору проб сцёкавых вод.

4. Узоры жывёл: для жывых жывёл мазкі для ўзяцця проб можна выкарыстоўваць для збору мазкоў з паверхні цела, мазкоў з ротаглоткі і анальных мазкоў, а таксама ўзоры экскрыментаў або сакрэту, якія таксама могуць быць сабраны і адпаведным чынам запісаны ў пратакол.Для ўзораў жывёл, з якіх здымалі скуру і г.д., выкарыстоўвайце ватовыя тампоны для збору ўзораў мазкоў з паверхні іх цела і паражніны цела.Неабходна выкарыстоўваць раствор для захавання вірусаў у прабірцы для ўзяцця проб віруса, каб цалкам пранікнуць у ватовы тампон для адбору проб, а затым паўтарыць нанясенне на паверхню ўзору харчовых прадуктаў, які трэба забраць.Шабу больш чым у 3 разы.Пры гэтым неабходна выканаць шматкропкавы размеркаваны адбор на паверхні ўзору.

5. Іншыя прылады: кантэйнеры для транспарціроўкі і гадоўлі жывёл, такія як клеткі або акварыумы.Спачатку паназірайце або зразумейце канкрэтныя віды жывёл, якія захоўваюцца і разводзяцца ў кантэйнеры, і вазьміце ўзоры мазкоў на ўнутранай сценцы кантэйнера або вадкія ўзоры змесціва.

6. Збярыце пробы аэразоляў у месцах збору людзей, у дрэнна вентыляваных гандлёвых памяшканнях, офісах і пакоях адпачынку.

II.Інструменты выбаркі
1. Прабірка для збору крыві
Калі пазней вам спатрэбіцца зрабіць аналіз нуклеінавых кіслот і ўзоры антыкаагулянтаў, рэкамендуецца выкарыстоўваць для збору крыві вакуумны крывяносны сасуд, які змяшчае антыкаагулянт ЭДТА;для пробаў сыроваткі рэкамендуецца выкарыстоўваць вакуумны крывяносная пасудзіна без антыкаагулянтаў.

fdsgfd

2. Тампон для ўзяцця пробы

Рэкамендуецца выкарыстоўваць поліпрапіленавыя тампоны замест тампонаў з альгінату кальцыя або тампонаў з драўлянымі жэрдкамі, таму што яны могуць утрымліваць рэчывы, якія інактывуюць некаторыя вірусы і перашкаджаюць ПЦР-даследаванню.Нельга выкарыстоўваць тампоны з ватовымі галоўкамі, таму што баваўняныя валакна моцна адсарбуюць бялок і не лёгка вымываюцца ў наступны кансервацыйны раствор.

У «Тэхнічных спецыфікацыях для змешанага збору 10 у 1 і выяўлення новых нуклеінавых кіслот каранавіруса» выразна агаворваецца, што «тампон для адбору пробаў павінен быць выраблены з поліэстэру, нейлону і іншых матэрыялаў, якія не змяшчаюць бавоўны і альгіната кальцыя, а ручка павінна быць выраблена з недраўнянага матэрыялу.Кропка разлому знаходзіцца прыкладна ў 3 см ад верхняй часткі галоўкі тампона, якую лёгка зламаць».

CDC у Злучаных Штатах таксама адзначыў: «Выкарыстоўвайце толькі тампоны з сінтэтычнага валакна з пластмасавымі або драцянымі стрыжнямі.Не выкарыстоўвайце тампоны з альгінатам кальцыя або тампоны з драўлянымі стрыжнямі,паколькі яны могуць утрымліваць рэчывы, якія інактывуюць некаторыя вірусы і перашкаджаюць правядзенню ПЦР.

У цяперашні час шырока выкарыстоўваецца аднаразовы стэрыльны нейлонавы тампон для флокирования ў спалучэнні з пластыкавым стрыжнем.Флокирующий тампон мае лепшае водапаглынанне і хуткасць вызвалення.У залежнасці ад розных месцаў адбору пробаў галоўка тампона таксама мае розныя памеры і валакна.Таўшчыня.»

фсдг

3. Узор кансервацыйнага раствора пры транспарціроўцы

Кансервацыйны раствор для інактывацыі віруса: адпаведная колькасць канцэнтрацыі гуанідзінавай солі і розныя кампаненты лізісу віруса могуць непасрэдна лізаваць вірус з вызваленнем нуклеінавай кіслаты, інактываваць РНКазу і ДНКазу і забяспечыць цэласнасць нуклеінавай кіслаты, якая можа быць выкарыстана для наступнага выяўлення qPCR.Яго нельга выкарыстоўваць для культывавання і вылучэння вірусаў.

Раствор для транспарціроўкі і захавання вірусаў: змяшчае солі, амінакіслоты, вітаміны, глюкозу і бялок, неабходныя для выжывання віруса, якія могуць падтрымліваць актыўнасць віруса.Яго можна выкарыстоўваць для экстракцыі нуклеінавых кіслот і выяўлення віруса ў будучыні, а таксама для культывавання і падзелу віруса.

4. Прабірка для захавання ўзораў і пакет для ўзораў

Прабірка для захоўвання ўзору павінна быць стэрыльнай пластыкавай прабіркай з закручваецца вечкам, якая не адсарбуе нуклеінавую кіслату.Кожную прабірку з узорам трэба накрыць пакетам для ўзору, каб прадухіліць уцечку і забруджванне ўзору.

fdsdf

III.Рэчывы, якія перашкаджаюць ва ўзоры

Рэчывы, якія перашкаджаюць у эксперыментах ПЦР

1. эндагенны інтэрферэнтны

Рэчывы, якія прысутнічаюць у пробе цела, могуць перашкаджаць выяўленню іншых рэчываў.

кроў:гем (>1мг/мл), гемін (>0,1нг/мкл), трыгліцерыдаў, IgG і інш.;

мача:Мачавіна (20мМ);

зэдлік:раслінныя поліцукрыды, холат;

Тканіна:протеаза, калаген;

Малако: протеаза, іён кальцыя;

Наркотыкі: антыбіётыкі, супрацьвірусныя прэпараты, гармоны і інш.

іншае.

2. экзагенныя інтэрферэнтныя

Ён паходзіць ад рэчываў, якія могуць перашкаджаць выяўленню іншых рэчываў in vitro.Дабаўкі і рэчывы для ўзораў, з якімі можна кантактаваць падчас збору і апрацоўкі ўзораў:

Тэставыя матэрыялы: гель для аддзялення сыроваткі, кантэйнер для збору пробы і гумавая корак, катетер, вадкасць для прамывання катетера, парашок для пальчатак і г.д.

Антыкаагулянт: гепарын (>0,1 ЕД/мл), ЭДТА (>0,5 ммоль) і інш.;

Арганічныя растваральнікі: изопропанол (>0,1 МЕ/мл), бэтаін, диметилсульфоксид, формамид, гліцэрына, ПЭГ і інш.;

Дэзінфікуючыя сродкі: спірты (этанол>1%), альдэгіды, фенолы (фенол>0,2%), пераксіды, моцныя кіслоты (HCL), моцныя шчолачы (NaOH) і інш.;

мыйны сродак:SDS (>0,005%);

глеба: Перагной

фарбавальнікі: Індыга

іншае.

У рэальных умовах адбору пробаў на адкрытым паветры, такіх як збор проб навакольнага асяроддзя, узоры могуць утрымліваць розныя рэчывы, якія перашкаджаюць, і склад рэчываў, якія перашкаджаюць, у кожным месцы адрозніваецца, што патрабуе правядзення эксперыментаў па інтэрферэнцыі ПЦР у адпаведнасці з мясцовымі ўмовамі.

IV.Умовы захоўвання і транспарціроўкі проб

Свежесобранные клінічныя ўзоры павінны быць адпраўлены ў лабараторыю на працягу 2-4 гадзін пасля збору пры тэмпературы ад 2°C да 8°C.Захоўваць пры 4 ℃ на працягу 24 гадзін.Узоры, якія выкарыстоўваюцца для вылучэння віруса і выяўлення нуклеінавых кіслот, павінны быць даследаваны як мага хутчэй.Узоры, якія можна праверыць на працягу 24 гадзін, можна захоўваць пры тэмпературы 4°C;Узоры, якія не могуць быць выяўлены на працягу 24 гадзін, павінны захоўвацца пры тэмпературы -70°C або ніжэй (калі няма - захоўваць пры тэмпературы 70°C у халадзільніку пры тэмпературы -20°C).

Рэзюмэ:Стандартызаваны збор, транспарціроўка і захоўванне проб неабходныя для наступнага тэставання.Ілжывыя адмоўныя вынікі многіх лабараторных аналізаў выкліканы няправільным зборам, транспарціроўкай і захоўваннем узораў, якія прыводзяць да дэградацыі нуклеінавай кіслаты віруса.Аднак многія лабараторыі па-ранейшаму ігнаруюць важнасць адбору проб.Я спадзяюся, што гэты артыкул можа абудзіць усеагульную ўвагу да адбору проб і зрабіць адбор проб больш навуковым і разумным!

Звязаны прадукт:

Набор для выяўлення варыянту нуклеінавых кіслот SARS-CoV-2 (I) (метад мультыплекснага ПЦР з флуоресцентным зондам) - для выяўлення мутантаў з Бразіліі, Паўднёвай Афрыкі і Вялікабрытаніі


Час публікацыі: 17 верасня 2021 г