Нараджэнне ПЦР
ПЦР (палімеразная ланцуговая рэакцыя)
З моманту вынаходства палімеразнай ланцуговай рэакцыі прайшло больш за 30 гадоў.На працягу больш чым 30 гадоў, пасля таго як шматлікія навукоўцы ва ўсім свеце працягваюць дапаўняць і ўдасканальваць, тэхналогія ПЦР стала найбольш шырока і часта выкарыстоўваным і самым важным фундаментальным метадам даследавання ва ўсёй галіне навук аб жыцці.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR і г.д., распрацаваныя на аснове шырокага прымянення традыцыйнай тэхналогіі ПЦР, а таксама нядаўна з'яўленая лічбавая ПЦР (лічбавая ПЦР), значна ўзбагацілі метады даследавання большасці навуковых даследчыкаў і значна паскорылі працэс развіцця сучасных навук аб жыцці, асабліва малекулярнай біялогіі, унеслі вялікі ўклад у вывучэнне жыцця і прыроды чалавецтва ў цэлым.
Дэфекты традыцыйнай тэхналогіі ПЦР
Комплекс падзелу нуклеінавых кіслот іздабыча:
★ Традыцыйная тэхналогія ПЦР: патрабуецца
★ ПЦР-тэхналогія: патрабуецца
★ Узоры ДНК і РНК: вялікія адрозненні, складаныя патрабаванні да працы
★ Небяспека для арганізма: таксічныя рэагенты шкодзяць арганізму
Традыцыйная тэхналогія ПЦР і вытворная тэхналогія маюць перадумову - падзел і ачыстку нуклеінавых кіслот
Любы біялагічны ўзор павінен прайсці праз шэраг складаных і стомных апрацовак узораў, каб атрымаць узоры нуклеінавых кіслот, якія адпавядаюць патрабаванням тэхналогіі ПЦР.
Раздзяленне і вылучэнне ДНК і РНК заўсёды было асноўнай задачай, якую адпаведныя навуковыя даследчыкі павінны паўтараць кожны дзень.
З-за велізарных адрозненняў паміж узорамі працэсы падзелу і экстракцыі ДНК і РНК таксама моцна адрозніваюцца.Гэтая праца патрабуе ад аператараў высокага ўзроўню тэхнічнай падрыхтоўкі.Традыцыйныя метады падзелу і экстракцыі патрабуюць працяглага кантакту з некаторымі вельмі таксічнымі хімічнымі рэагентамі.Гэта нанясе незваротную шкоду арганізму аператара і нават нанясе прамую шкоду падчас эксперыменту.
У той жа час для тых, хто мае вялікую колькасць узораў для вывучэння, падзел і вылучэнне нуклеінавых кіслот - працаёмкая задача.
Наборы для вылучэння і экстракцыі нуклеінавых кіслот на рынку ўжо сталыя, і існуе мноства брэндаў, але яны прыкладна аднолькавыя.Незалежна ад таго, ці з'яўляецца гэта цэнтрабежны набор для калонкі з силикагелевой мембранай або набор для метаду магнітных шарыкаў, гэта займае шмат часу і дорага.Акрамя кошту камплекта, асаблівыя патрабаванні прад'яўляюцца і да лабараторнага абсталявання.Аўтаматызаваная рабочая станцыя, якая выкарыстоўваецца ў метадзе магнітных шарыкаў, з'яўляецца вельмі тыповым буйнамаштабным абсталяваннем высокай кошту, якое з'яўляецца вялікімі выдаткамі для лабараторыі.
Падводзячы вынік
Перад правядзеннем ПЦР-эксперыментаў папярэдняя апрацоўка узораў з'яўляецца непазбежным і заўсёды галаўным болем для даследчыкаў.Пра тое, як вырашыць гэтую праблему і ці можна праводзіць ПЦР-эксперыменты без падзелу і экстракцыі нуклеінавых кіслот, заўсёды думала большасць навуковых даследчыкаў і персаналу клінічных лабараторый.
Рашэнне Foregene
Пасля многіх гадоў карпатлівых даследаванняў тэхналогіі прамой ПЦР і адпаведных набораў, Forgene паспяхова пераадолела мноства вузкіх месцаў і паспяхова дасягнула прамой ПЦР для многіх тыпаў розных узораў з моцнай устойлівасцю і здольнасцю да адаптацыі, што дазволіла даследчыкам пазбавіцца ад грувасткага і небяспечнага падзелу і экстракцыі нуклеінавых кіслот.Гэта значна знізіць працаёмкасць кожнага, паскорыць працэс эксперыменту і зэканоміць выдаткі на навуковыя даследаванні і выпрабаванні.
Разуменне і веданне Forgene DirectPCR
Па-першае, тэхналогія DirectPCR - гэта тэхналогія прамой ПЦР для розных біялагічных узораў тканін.Пры гэтым тэхнічным стане няма неабходнасці аддзяляць і выдзяляць нуклеінавыя кіслоты, а ўзор тканіны непасрэдна выкарыстоўваецца ў якасці аб'екта, а праймеры гена-мішэні дадаюцца для рэакцыі ПЦР.
Па-другое, тэхналогія DirectPCR - гэта не толькі традыцыйная тэхналогія ампліфікацыі шаблону ДНК, але і ПЦР са зваротнай транскрыпцыяй РНК.
Па-трэцяе, тэхналогія DirectPCR не толькі непасрэдна выконвае звычайныя якасныя рэакцыі ПЦР на ўзорах тканін, але таксама ўключае рэакцыі кПЦР у рэальным часе, што патрабуе ад рэакцыйнай сістэмы моцнай здольнасці супрацьстаяць фонавым перашкодам флуарэсцэнцыі і антаганізаваць эндагенныя тушыцелі флуарэсцэнцыі.
Па-чацвёртае, узоры тканін, на якія арыентавана тэхналогія DirectPCR, патрабуюць толькі вызвалення шаблонаў нуклеінавых кіслот і не выдаляюць бялкі, поліцукрыды, іёны соляў і г.д., якія перашкаджаюць рэакцыі ПЦР.Гэта патрабуе, каб палімераза нуклеінавых кіслот і ПЦР-мікс у рэакцыйнай сістэме валодалі выдатнай антызваротнасцю і здольнасцю да адаптацыі, а таксама забяспечвалі актыўнасць фермента і дакладнасць рэплікацыі ў складаных умовах.
Па-пятае, узоры тканін, на якія нацэлена тэхналогія DirectPCR, не падвяргаліся ніякай апрацоўцы ўзбагачэння нуклеінавых кіслот, і колькасць шаблону вельмі малая, што патрабуе надзвычай высокай адчувальнасці і эфектыўнасці ампліфікацыі рэакцыйнай сістэмы.
Заключэнне
Тэхналогія DirectPCR - адна з найважнейшых тэхналагічных распрацовак і інавацый за апошнія 30 гадоў з моманту з'яўлення тэхналогіі ПЦР.Кампанія Forgene была і будзе заставацца піянерам і наватарам гэтай тэхналогіі.
Перспектывы прымянення тэхналогіі DirectPCR вельмі шырокія.Пастаяннае ўдасканаленне і прасоўванне гэтай тэхналогіі, несумненна, прынясе падрыўныя змены ў навукова-даследчай і інспекцыйнай працы.Гэта рэвалюцыя ў тэхналогіі ПЦР.
Час размяшчэння: 21 лютага 2017 г
