• facebook
  • Linkedin
  • youtube

Антыцелы, таксама званыя імунаглабулінамі (Ig), - гэта глікапратэіны, якія спецыфічна звязваюцца з антыгенамі.
 
Звычайны прэпарат антыцелаў вырабляецца шляхам імунізацыі жывёл і збору антысыроваткі.Такім чынам, антысыроватка звычайна змяшчае антыцелы супраць іншых нероднасных антыгенаў і іншых бялковых кампанентаў сыроваткі.Малекулы агульнага антыгена ў асноўным утрымліваюць некалькі розных эпітопаў, таму звычайныя антыцелы таксама з'яўляюцца сумессю антыцелаў супраць некалькіх розных эпітопаў.Нават звычайныя антыцелы ў сыроватцы крыві, накіраваныя супраць аднаго і таго ж эпітопа, усё яшчэ складаюцца з гетэрагенных антыцелаў, вырабленых рознымі клонамі В-клетак.Такім чынам, звычайныя антыцелы ў сыроватцы таксама называюць поліклональнымі антыцеламі або скарочана поліклональнымі антыцеламі.
 
Манаклональныя антыцелы (монаклональныя антыцелы) - гэта вельмі аднастайныя антыцелы, якія выпрацоўваюцца адным клонам В-клетак і накіраваны толькі супраць пэўнага эпітопу.Звычайна яго рыхтуюць з дапамогай гібрыдомнай тэхналогіі — тэхналогія гібрыдомных антыцелаў заснавана на тэхналогіі зліцця клетак, аб'ядноўваючы В-клеткі, здольныя вылучаць спецыфічныя антыцелы, і миеломные клеткі з бясконцай здольнасцю да росту ў гібрыдомы В-клетак.Гэтая гибридомная клетка мае характарыстыкі бацькоўскай клеткі.Ён можа бясконца і несмяротна размнажацца in vitro, як клеткі миеломы, і можа сінтэзаваць і вылучаць спецыфічныя антыцелы, як лімфацыты селязёнкі.З дапамогай кланавання можа быць атрымана моноклональная лінія, атрыманая з адной гибридомной клеткі, гэта значыць клеткавая лінія гибридомы.Антыцелы, якія ён выпрацоўвае, з'яўляюцца вельмі гамагеннымі антыцеламі супраць адной і той жа антыгеннай дэтэрмінанты, гэта значыць моноклональными антыцеламі.
 
Антыцелы існуюць у выглядзе аднаго або некалькіх Y-вобразных манамераў (напрыклад, моноклональных антыцелаў або поликлональных антыцелаў).Кожны Y-вобразны манамер складаецца з 4 поліпептыдных ланцугоў, уключаючы дзве аднолькавыя цяжкія ланцугі і дзве аднолькавыя лёгкія ланцугі.Лёгкі ланцуг і цяжкі ланцуг называюцца ў адпаведнасці з іх малекулярнай масай.Верхняя частка Y-вобразнай структуры - гэта варыябельная вобласць, якая з'яўляецца месцам звязвання антыгена.(Урывак з канцэпцыі бія-монаклональных антыцелаў Detai)
 
Структура антыцелаў
1Цяжкі ланцуг
Існуе пяць тыпаў цяжкіх ланцугоў Ig млекакормячых, названых грэчаскімі літарамі α, δ, ε, γ і μ.Адпаведныя антыцелы называюцца IgA, IgD, IgE, IgG і IgM.Розныя цяжкія ланцугі адрозніваюцца па памеры і складу.α і γ ўтрымліваюць прыкладна 450 амінакіслот, у той час як μ і ε ўтрымліваюць каля 550 амінакіслот.
Кожная цяжкая ланцуг мае дзве вобласці: канстантную вобласць і зменную вобласць.Усе антыцелы аднаго тыпу маюць аднолькавую канстантную вобласць, але паміж антыцеламі розных тыпаў ёсць адрозненні.Канстантныя вобласці цяжкіх ланцугоў γ, α і δ складаюцца з трох даменаў Ig у тандэме з шарнірнай вобласцю для павышэння гнуткасці;канстантныя вобласці цяжкіх ланцугоў μ і ε складаюцца з 4 даменаў Ig.Варыябельная вобласць цяжкай ланцуга антыцелаў, якая выпрацоўваецца рознымі В-клеткамі, розная, але варыябельная вобласць антыцелаў, якая выпрацоўваецца адной і той жа У-клеткай або клеткавым клонам, аднолькавая, і варыябельная вобласць кожнай цяжкай ланцуга складае каля 110 амінакіслот у даўжыню., І ўтвараюць адзіны дамен Ig.
 
Лёгкі ланцуг
У млекакормячых існуе толькі два тыпу лёгкіх ланцугоў: тып лямбда і тып капа.Кожная лёгкая ланцуг мае два звязаныя дамена: канстантную вобласць і варыябельную вобласць.Даўжыня лёгкага ланцуга складае каля 211~217 амінакіслот.Дзве лёгкія ланцугі, якія змяшчаюцца ў кожным антыцелы, заўсёды аднолькавыя.Для млекакормячых лёгкі ланцуг у кожным антыцеле мае толькі адзін тып: капа або лямбда.У некаторых ніжэйшых пазваночных, такіх як храстковыя рыбы (храстковыя рыбы) і касцяныя рыбы, таксама сустракаюцца іншыя тыпы лёгкіх ланцугоў, напрыклад, тып ёты (ёта).
 
Сегменты Fab і Fc
Сегмент Fc можа быць непасрэдна аб'яднаны з ферментамі або флуарэсцэнтнымі фарбавальнікамі для пазначэння антыцелаў.Гэта тая частка, дзе антыцела заклёпваецца на пласціне падчас працэсу ELISA, а таксама гэта тая частка, дзе другое антыцела распазнаецца і звязваецца пры імунапрэцыпітацыі, імунаблотынгу і імунагістахіміі.Антыцелы могуць быць гидролизованы на два сегмента F(ab) і адзін сегмент Fc з дапамогай пратэялітычных ферментаў, такіх як папаін, або яны могуць быць разбіты з шарнірнай вобласці пепсінам і гидролизован на адзін сегмент F(ab)2 і адзін сегмент Fc.Фрагменты антыцелаў IgG часам вельмі карысныя.З-за адсутнасці сегмента Fc сегмент F(ab) не будзе выпадаць у асадак з антыгенам і не будзе захоплівацца імуннымі клеткамі ў даследаваннях in vivo.З-за невялікіх малекулярных фрагментаў і адсутнасці функцыі сшывання (з-за адсутнасці сегмента Fc) сегмент Fab звычайна выкарыстоўваецца для пазнакі радыеактыўнай пазнакі ў функцыянальных даследаваннях, а сегмент Fc у асноўным выкарыстоўваецца ў якасці блакіруючага агента пры гістахімічным афарбоўванні.
 
Пераменныя і пастаянныя вобласці
Варыябельная вобласць (V вобласць) размешчана ў 1/5 або 1/4 (змяшчае каля 118 амінакіслотных рэшткаў) Н-ланцуга каля N-канца і 1/2 (змяшчае каля 108-111 амінакіслотных рэшткаў) каля N-канца L-ланцуга.Кожная V вобласць мае пептыдная кольца, утворанае ўнутрыланцуговымі дысульфіднымі сувязямі, і кожнае пептыднае кольца змяшчае прыблізна ад 67 да 75 амінакіслотных астаткаў.Склад і размяшчэнне амінакіслот у V вобласці вызначаюць спецыфічнасць звязвання антыгена антыцелаў.З-за пастаянна змяняюцца тыпаў і паслядоўнасці амінакіслот у вобласці V можа ўтварацца шмат відаў антыцелаў з рознай спецыфічнасцю звязвання антыгена.V-вобласці L-ланцуга і H-ланцуга называюцца VL і VH адпаведна.У VL і VH амінакіслотны склад і паслядоўнасць некаторых лакальных рэгіёнаў маюць больш высокую ступень варыяцый.Гэтыя вобласці называюцца гипервариабельными абласцямі (HVR).Амінакіслотны склад і размяшчэнне не-HVR частак у V вобласці адносна кансерватыўныя, што называецца каркаснай вобласцю.У VL ёсць тры гипервариабельные вобласці, звычайна размешчаныя ў амінакіслотных рэштках ад 24 да 34 і ад 89 да 97 адпаведна.Тры HVR VL і VH называюцца HVR1, HVR2 і HVR3 адпаведна.Даследаванне і аналіз рэнтгенаўскай дыфракцыі крышталяў даказалі, што гіперварыябельная вобласць сапраўды з'яўляецца месцам, дзе звязваецца антыген антыцелаў, таму яе называюць вобласцю, якая вызначае камплементарнасць (CDR).HVR1, HVR2 і HVR3 VL і VH можна назваць CDR1, CDR2 і CDR3 адпаведна.Як правіла, CDR3 мае больш высокую ступень гипервариабельности.Гіперварыябельная вобласць таксама з'яўляецца асноўным месцам, дзе існуюць ідыятыпічныя дэтэрмінанты малекул Ig.У большасці выпадкаў ланцуг Н гуляе больш важную ролю ў звязванні з антыгенам.
2Сталая вобласць (вобласць C)знаходзіцца на 3/4 або 4/5 (прыкладна ад амінакіслоты 119 да С-канца) Н-ланцуга каля С-канца і на 1/2 (змяшчае каля 105 амінакіслотных рэшткаў) паблізу С-канца L-ланцуга.Кожная функцыянальная вобласць ланцуга Н змяшчае каля 110 амінакіслотных астаткаў і змяшчае пептыдная кольца, якое складаецца з 50-60 амінакіслотных астаткаў, злучаных дысульфіднымі сувязямі.Амінакіслотны склад і размяшчэнне гэтай вобласці адносна сталыя ў адной і той жа ланцугу L з изотипом Ig жывёл і ў ланцугу H таго ж тыпу.Тое ж самае, ён можа толькі спецыфічна звязвацца з адпаведным антыгенам, але структура яго вобласці С такая ж, гэта значыць ён валодае аднолькавай антыгеннасці.Другасныя антыцелы (або антыцелы) супраць IgG коней (або антыцелы) можна камбінаваць з двума. Узнікае камбінацыя антыцелаў (IgG) супраць розных экзатаксінаў.Гэта важная аснова для падрыхтоўкі другасных антыцелаў і прымянення флюарэсцэну, ізатопаў, ферментаў і іншых пазначаных антыцелаў.
 
 
Спадарожныя тавары:
Набор Cell Direct RT-qPCR

 

 


Час публікацыі: 30 верасня 2021 г